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<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html;charset=UTF-8"><base href="https://ojs.europubpublications.com/ojs/index.php/ced/article/view/3505"><div style="background:#fff;border:1px solid #999;margin:-1px -1px 0;padding:0;"><div style="background:#ddd;border:1px solid #999;color:#000;font:13px arial,sans-serif;font-weight:normal;margin:12px;padding:8px;text-align:left">This is the html version of the file <a href="https://ojs.europubpublications.com/ojs/index.php/ced/article/view/3505"><font color=blue>https://ojs.europubpublications.com/ojs/index.php/ced/article/view/3505</font></a>.<br> Google automatically generates html versions of documents as we crawl the web.<div style="margin-top:8px">These search terms have been highlighted: <span style="background-color:#ffff66;color:black;font-weight:bold;">temperatura </span><span style="background-color:#ffff66;color:black;font-weight:bold;">ambiente </span></div></div></div><div style="position:relative"><html> <head> <style type="text/css">  </style> <meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=UTF-8"> <meta name="byte-checksum" content="e66cb8394241196084d35138863b22a956b701cbf771c17436521ef6eb3f6aef"> <meta name="Author" content="BJD"> <meta name="CreationDate" content="D:20240229143351-03'00'"> <meta name="Creator" content="Microsoft® Word 2019"> <meta name="ModDate" content="D:20240229143351-03'00'"> <meta name="Producer" content="Microsoft® Word 2019"> <title>Efeito da adição do extrato de capim-santo (Cymbopogon citratus) sobre a refrigeração de espermatozoides epididimários bovi</title> </head><body bgcolor=#ffffff vlink="blue" link="blue"> <table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=1><b>Page 1</b></a></font></td></tr></table><font size=3 face="Times"><span style="font-size:11px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:231;left:581"><nobr>DOI: 10.55905/cuadv16n2-122 </nobr></div> <div style="position:absolute;top:262;left:582"><nobr>Originals received: 01/09/2024</nobr></div> <div style="position:absolute;top:278;left:532"><nobr>Acceptance for publication: 02/16/2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:1390;left:778"><nobr>2</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:1393;left:168"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, v.16, n.2, p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:19px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:371;left:158"><nobr><b>Efeito da adição do extrato de capim-santo (Cymbopogon</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:395;left:197"><nobr><b>citratus) sobre a refrigeração de espermatozoides</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:419;left:335"><nobr><b>epididimários bovinos</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:468;left:153"><nobr><b>Effect of the addition of lemon grass extract (Cymbopogon</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:492;left:195"><nobr><b>citratus) on the refrigeration of bovine epididimary</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:516;left:382"><nobr><b>spermatozoa</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:564;left:193"><nobr><b>Efecto de la adición de extracto de hierba de limón</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:588;left:205"><nobr><b>(Cymbopogon citratus) sobre la refrigeración de</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:612;left:255"><nobr><b>espermatozoos epididimarios bovinos</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:657;left:128"><nobr><b>Matheus Soares da Silva Melo</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:677;left:128"><nobr>Bacharel em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:698;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:719;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:740;left:128"><nobr>E-mail: mxthevs@gmail.com</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:781;left:128"><nobr><b>Alex Souza Rique</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:802;left:128"><nobr>Mestre em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:822;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:843;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:864;left:128"><nobr>E-mail: alexrique@outlook.com</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:905;left:128"><nobr><b>Kassia Cristina de Barros</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:926;left:128"><nobr>Graduanda em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:947;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:967;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:988;left:128"><nobr>E-mail: academicoagatha@gmail.com </nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:1029;left:128"><nobr><b>Luiz Henrique Sampaio Gurgel</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:1050;left:128"><nobr>Bacharel em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1071;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1092;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1112;left:128"><nobr>E-mail: h2oooriginal@gmail.com</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:1154;left:128"><nobr><b>Arianne Raquel de Menezes Morais</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:1174;left:128"><nobr>Mestranda em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1195;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1216;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1236;left:128"><nobr>E-mail: ariannemenezesrha@gmail.com </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:1437;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=2><b>Page 2</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:2653;left:799"><nobr>3</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:2655;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:1632;left:128"><nobr><b>Camilla Flávia Avelino de Farias</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:1653;left:128"><nobr>Doutoranda em Biotecnologia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1674;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1694;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1715;left:128"><nobr>E-mail: camillafafarias@gmail.com </nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:1757;left:128"><nobr><b>Sildivane Valcácia Silva</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:1777;left:128"><nobr>Doutora em Medicina Veterinária</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1798;left:128"><nobr>Instituição: Universidade Federal da Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1819;left:128"><nobr>Endereço: Jardim Cidade Universitária, João Pessoa - PB, CEP: 58050-585</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1839;left:128"><nobr>E-mail: sildivane@cbiotec.ufpb.br</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:1881;left:128"><nobr><b>RESUMO</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:1902;left:128"><nobr>Objetivou-se neste trabalho obter um extrato bruto etanólico de capim-santo e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1922;left:128"><nobr>testar o seu efeito na refrigeração de espermatozoides epididimários de bovinos.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1943;left:128"><nobr>O <i>Cymbopogon citratus </i>foi obtido <i>in natura </i>e submetido à secagem e, após isso,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1964;left:128"><nobr>feita a extração em etanol. O extrato bruto foi caracterizado quanto aos seus</nobr></div> <div style="position:absolute;top:1984;left:128"><nobr>metabólitos secundários, quantidade de açúcares redutores e potencial</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2005;left:128"><nobr>antioxidante. O extrato foi diluído em solução TRIS e adicionado ao diluidor</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2026;left:128"><nobr>TRIS-gema nas concentrações de 0% (TG), 1% (TGE1), 5% (TGE5) e 10%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2046;left:128"><nobr>(TGE10). Os diluidores formados foram avaliados quanto à osmolaridade,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2067;left:128"><nobr>potencial hidrogeniônico e capacidade de preservação em espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2088;left:128"><nobr>bovinos refrigerados a 5 °C, durante 48 h. Os resultados mostraram que o extrato</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2109;left:128"><nobr>etanólico bruto de capim-santo possui, em sua composição, flavonoides,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2129;left:128"><nobr>glicosídeos, taninos e esteroides, assim como 31% de açúcares redutores, além</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2150;left:128"><nobr>de um potencial antioxidante de valor IC₅₀ = 0,1965 mg/mL e equivalência ao</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2171;left:128"><nobr>Trolox (TEAC) = 0,1012 mM, considerando a concentração de 1,0 mg/mL.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2192;left:128"><nobr>Quanto à avaliação dos espermatozoides acrescidos do extrato no diluidor para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2212;left:128"><nobr>criopreservação, os grupos que tiveram adição de extrato (TGE1, TGE5 e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2233;left:128"><nobr>TGE10) obtiveram resultados semelhantes ao grupo controle (TG) tanto em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2254;left:128"><nobr>motilidade, integridade de membrana e funcionalidade de membrana em relação</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2275;left:128"><nobr>aos tempos testados, não apresentando diferença significativa (p> 0,05). Diante</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2295;left:128"><nobr>dos resultados obtidos, pode-se afirmar que a adição do extrato etanólico bruto</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2316;left:128"><nobr>de capim-santo, nas concentrações testadas, não influencia na refrigeração de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2337;left:128"><nobr>espermatozoides epididimários bovinos. Contudo, por apresentar potencial</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2357;left:128"><nobr>antioxidante e níveis consideráveis de açúcares redutores, o extrato etanólico</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2378;left:128"><nobr>bruto de capim-santo pode ser avaliado, em outras diferentes concentrações,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2399;left:128"><nobr>como aditivo na criopreservação de espermatozoides.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:2440;left:128"><nobr><b>Palavras-chave: </b><font color="#000000">bioativo, criopreservação, diluidor.</font></nobr></div> <div style="position:absolute;top:2482;left:128"><nobr><b>ABSTRACT</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:2502;left:128"><nobr>The objective of this work was to obtain a crude ethanolic extract of lemongrass</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2523;left:128"><nobr>and test its effect on the refrigeration of bovine epididymal spermatozoa.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2544;left:128"><nobr>Cymbopogon citratus was obtained in natura and subjected to drying and, after</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2564;left:128"><nobr>that, extraction was carried out in ethanol. The crude extract was characterized</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2585;left:128"><nobr>regarding its secondary metabolites, amount of reducing sugars and antioxidant </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:2699;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=3><b>Page 3</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:3915;left:799"><nobr>4</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:3917;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:2894;left:128"><nobr>potential. The extract was diluted in TRIS solution and added to the TRIS-yolk</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2915;left:128"><nobr>extender at concentrations of 0% (TG), 1% (TGE1), 5% (TGE5) and 10%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2936;left:128"><nobr>(TGE10). The extenders formed were evaluated for osmolarity, hydrogen</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2956;left:128"><nobr>potential and preservation capacity in bovine spermatozoa refrigerated at 5 °C</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2977;left:128"><nobr>for 48 h. The results showed that the crude ethanolic extract of lemongrass has,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:2998;left:128"><nobr>in its composition, flavonoids, glycosides, tannins and steroids, as well as 31%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3019;left:128"><nobr>reducing sugars, in addition to an antioxidant potential with an IC₅₀ value = 0.1965</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3040;left:128"><nobr>mg/mL and equivalence to Trolox (TEAC) = 0.1012 mM, considering a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3060;left:128"><nobr>concentration of 1.0 mg/mL. Regarding the evaluation of spermatozoa added with</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3081;left:128"><nobr>extract in the extender for cryopreservation, the groups that had extract added</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3102;left:128"><nobr>(TGE1, TGE5 and TGE10) obtained results similar to the control group (TG) both</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3122;left:128"><nobr>in motility, membrane integrity and membrane functionality in relation to the times</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3143;left:128"><nobr>tested, showing no significant difference (p> 0.05). Given the results obtained, it</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3164;left:128"><nobr>can be stated that the addition of crude ethanolic extract of lemongrass, in the</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3185;left:128"><nobr>concentrations tested, does not influence the refrigeration of bovine epididymal</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3205;left:128"><nobr>spermatozoa. However, as it has antioxidant potential and considerable levels of</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3226;left:128"><nobr>reducing sugars, the crude ethanolic extract of lemongrass can be evaluated, in</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3247;left:128"><nobr>other different concentrations, as an additive in sperm cryopreservation.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:3288;left:128"><nobr><b>Keywords: </b><font color="#000000">bioactive, cryopreservation, extender.</font></nobr></div> <div style="position:absolute;top:3329;left:128"><nobr><b>RESUMEN</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:3350;left:128"><nobr>El objetivo de este trabajo fue obtener un extracto etanólico crudo de limoncillo y</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3371;left:128"><nobr>probar su efecto sobre la refrigeración de espermatozoides epididimarios</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3392;left:128"><nobr>bovinos. Cymbopogon citratus se obtuvo in natura y se sometió a secado y,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3412;left:128"><nobr>posteriormente, se realizó la extracción en etanol. El extracto crudo se</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3433;left:128"><nobr>caracterizó respecto a sus metabolitos secundarios, cantidad de azúcares</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3454;left:128"><nobr>reductores y potencial antioxidante. El extracto se diluyó en solución TRIS y se</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3474;left:128"><nobr>añadió al extensor de yema TRIS en concentraciones de 0% (TG), 1% (TGE1),</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3495;left:128"><nobr>5% (TGE5) y 10% (TGE10). Los diluyentes formados fueron evaluados en cuanto</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3516;left:128"><nobr>a osmolaridad, potencial de hidrógeno y capacidad de conservación en</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3537;left:128"><nobr>espermatozoides bovinos refrigerados a 5 °C durante 48 h. Los resultados</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3557;left:128"><nobr>demostraron que el extracto etanólico crudo de limoncillo tiene en su</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3578;left:128"><nobr>composición flavonoides, glucósidos, taninos y esteroides, así como un 31% de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3599;left:128"><nobr>azúcares reductores, además de un potencial antioxidante con un valor IC₅₀ =</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3620;left:128"><nobr>0,1965 mg/mL y equivalencia a Trolox (TEAC) = 0,1012 mM, considerando una</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3640;left:128"><nobr>concentración de 1,0 mg/mL. En cuanto a la evaluación de los espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3661;left:128"><nobr>adicionados con extracto en el diluyente para criopreservación, los grupos a los</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3682;left:128"><nobr>que se les agregó extracto (TGE1, TGE5 y TGE10) obtuvieron resultados</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3703;left:128"><nobr>similares al grupo control (TG) tanto en motilidad, integridad de la membrana y</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3723;left:128"><nobr>funcionalidad de la membrana en relación con el tiempos probados, no</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3744;left:128"><nobr>mostrando diferencia significativa (p>0,05). Dados los resultados obtenidos, se</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3765;left:128"><nobr>puede afirmar que la adición de extracto etanólico crudo de limoncillo, en las</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3785;left:128"><nobr>concentraciones probadas, no influye en la refrigeración de los espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3806;left:128"><nobr>epididimarios bovinos. Sin embargo, al tener potencial antioxidante y niveles</nobr></div> <div style="position:absolute;top:3827;left:128"><nobr>considerables de azúcares reductores, el extracto etanólico crudo de limoncillo </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:3961;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=4><b>Page 4</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:5177;left:799"><nobr>5</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:5179;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:4156;left:128"><nobr>puede evaluarse, en otras concentraciones diferentes, como aditivo en la</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4177;left:128"><nobr>criopreservación de esperma.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:4218;left:128"><nobr><b>Palabras clave: </b><font color="#000000">bioactivo, criopreservación, diluyente.</font></nobr></div> <div style="position:absolute;top:4301;left:128"><nobr><b>1 INTRODUÇÃO</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:4332;left:181"><nobr>A criação de gado bovino está presente no Brasil desde os primeiros anos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4363;left:128"><nobr>da sua colonização, onde exerceu forte influência na expansão econômica,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4395;left:128"><nobr>destacando-se no setor de exportações (Teixeira, 2014). Ainda hoje, a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4426;left:128"><nobr>bovinocultura é uma das atividades mais importantes dentro da agropecuária,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4457;left:128"><nobr>segundo dados do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE, 2022), o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4488;left:128"><nobr>rebanho bovino brasileiro é de aproximadamente 224,6 milhões de cabeças,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4519;left:128"><nobr>sendo o segundo maior rebanho do mundo, atrás apenas da Índia, onde o abate</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4550;left:128"><nobr>de vacas é restrito na maioria dos estados e o abate de vaca para exportação é</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4581;left:128"><nobr>proibido. Desta forma, o Brasil é o detentor do maior rebanho comercial do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4612;left:128"><nobr>mundo.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4643;left:181"><nobr>Contudo, a taxa de desfrute (que mede a eficiência de aproveitamento de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4674;left:128"><nobr>um rebanho) do Brasil é de 19,2%, considerada baixa em relação à taxa de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4705;left:128"><nobr>países desenvolvidos, ficando atrás dos Estados Unidos e da Austrália, com</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4736;left:128"><nobr>38,0% e 30,9%, respectivamente (Alves, 2012). Diante disso, é imprescindível a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4767;left:128"><nobr>busca por técnicas que possam trazer uma maior eficiência produtiva para o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4798;left:128"><nobr>rebanho brasileiro, consequentemente, alavancando mais ainda esse setor que</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4829;left:128"><nobr>já é de tamanha importância (Nascimento; Batista Filho; Dias, 2016). Números</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4860;left:128"><nobr>elevados de reprodução bovina numa propriedade representam um bom fator de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4891;left:128"><nobr>eficiência e faz com que o pecuarista possa se manter na atividade com bom</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4922;left:128"><nobr>retorno econômico (REHAGRO, 2019).</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4953;left:181"><nobr>A técnica de reprodução mais usada e também a mais tradicional é a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:4984;left:128"><nobr>monta natural, que consiste em um touro mantido com as vacas durante o ano</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5015;left:128"><nobr>todo ou durante o período da estação de monta (REHAGRO, 2019), esse tipo de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5047;left:128"><nobr>técnica não permite um controle efetivo sobre o rebanho, levando a uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5078;left:128"><nobr>diminuição da velocidade de ganho genético (Pfeifer, 2010). Por outro lado, a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5109;left:128"><nobr>biotécnica usada na reprodução do gado bovino é a Inseminação Artificial (IA), </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:5223;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=5><b>Page 5</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:6439;left:799"><nobr>6</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:6441;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:5418;left:128"><nobr>que permite um aumento considerável do número de fêmeas que podem ser</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5450;left:128"><nobr>acasaladas com o mesmo macho, usando sêmen de touros geneticamente</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5480;left:128"><nobr>superiores, acelerando o ganho genético e resultando em bezerros mais</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5512;left:128"><nobr>produtivos, e evita também a transmissão de infecções sexualmente</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5543;left:128"><nobr>transmissíveis (Baruselli <i>et al</i>., 2019; Pfeifer, 2010). A técnica de IA se mostra</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5574;left:128"><nobr>uma alternativa melhor em aspectos econômicos (Johnson; Jones, 2008), de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5605;left:128"><nobr>confiabilidade (Baruselli <i>et al</i>., 2018) e eficiência reprodutiva (Terto; Souza <i>et al</i>.,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5636;left:128"><nobr>2014) quando comparada à monta natural.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5667;left:181"><nobr>Dentre as biotécnicas reprodutivas que podem estimular a produção</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5698;left:128"><nobr>bovina, a criopreservação é uma prática onde gametas e embriões são</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5729;left:128"><nobr>preservados através da refrigeração (15 °C; 5 °C) e/ou congelação a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5760;left:128"><nobr>temperaturas muito baixas (-196 °C). Essa técnica permite um melhor</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5791;left:128"><nobr>aproveitamento de animais de altos valores genéticos, atrelado ao</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5822;left:128"><nobr>armazenamento do material genético por tempo indeterminado (considerando a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5853;left:128"><nobr>congelação), transporte desse material para diversas localidades, até mesmo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5884;left:128"><nobr>entre países (Farias, 2020).</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5915;left:181"><nobr>Material genético de grande valor comercial pode ser perdido a qualquer</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5946;left:128"><nobr>momento num rebanho devido à morte inesperada do animal. Para evitar a perda</nobr></div> <div style="position:absolute;top:5977;left:128"><nobr>total, técnicas de reprodução assistida podem ser usadas para tal, como a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6008;left:128"><nobr>recuperação dos espermatozoides do epidídimo. Junto à criopreservação, se</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6039;left:128"><nobr>permite uma maneira mais eficiente e econômica de usar esse material, pois ele</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6071;left:128"><nobr>pode ser utilizado a qualquer momento, independente da morte do animal</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6102;left:128"><nobr>(Martins <i>et al</i>., 2016).</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6133;left:181"><nobr>Durante a criopreservação, utiliza-se um meio diluidor para fornecer aos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6164;left:128"><nobr>espermatozoides condições favoráveis para protegê-los dos danos que serão</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6195;left:128"><nobr>submetidos ao momento da redução da temperatura (Moore; Hasler, 2017). Os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6226;left:128"><nobr>extratos de plantas têm surgido como uma alternativa econômica e natural para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6257;left:128"><nobr>aprimorar a preservação e a função espermática durante o armazenamento do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6288;left:128"><nobr>sêmen. Muitas plantas contêm antioxidantes poderosos que podem ajudar a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6319;left:128"><nobr>neutralizar os efeitos prejudiciais do estresse oxidativo sobre a função</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6350;left:128"><nobr>espermática, atuando como inibidores de espécies reativas de oxigênio (ROS). </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:6485;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=6><b>Page 6</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:7701;left:799"><nobr>7</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:7703;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:6680;left:128"><nobr>Além disso, esses compostos naturais podem apresentar propriedades</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6712;left:128"><nobr>antimicrobianas e melhorar a atividade de várias enzimas antioxidantes (Ros-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6742;left:128"><nobr>Santaella; Pintus, 2017).</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6774;left:181"><nobr>O capim-santo (<i>Cymbopogon citratus</i>) pertence à família Poaceae, é uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6805;left:128"><nobr>espécie perene, originária da Europa, cultivada em quase todos os países</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6836;left:128"><nobr>tropicais, inclusive no Brasil. Essa planta é bastante usada na medicina popular</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6867;left:128"><nobr>do Brasil (Matos, 2021). Estudos previamente realizados mostram que o capim-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6898;left:128"><nobr>santo possui atividades antioxidantes (Oliveira <i>et al</i>., 2019), antimicrobianas</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6929;left:128"><nobr>(Sawadogo <i>et al</i>., 2022) e anti-inflamatórias (Sharma <i>et al</i>., 2021). Tais</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6960;left:128"><nobr>propriedades fazem do capim-santo um potencial aditivo para criopreservação</nobr></div> <div style="position:absolute;top:6991;left:128"><nobr>de espermatozoides. Baseado no exposto, objetivou-se obter e caracterizar o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7022;left:128"><nobr>extrato bruto etanólico de capim-santo (Cymbopogon citratus) e avaliar o efeito</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7053;left:128"><nobr>da adição deste extrato em diluidores na refrigeração de espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7084;left:128"><nobr>epididimários bovinos, a 5 ºC, por um período de 48 horas.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:7146;left:128"><nobr><b>2 MATERIAL E MÉTODOS</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:7177;left:128"><nobr>2.1 OBTENÇÃO E PREPARAÇÃO DO EXTRATO BRUTO DE CAPIM-SANTO</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:7208;left:181"><nobr>O material vegetal foi colhido no dia 24 de janeiro de 2023, do Horto de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7239;left:128"><nobr>Plantas Medicinais do Instituto de Pesquisa em Fármacos e Medicamentos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7270;left:128"><nobr>(IPeFarM), localizado na Universidade Federal da Paraíba, no município de João</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7301;left:128"><nobr>Pessoa – PB (7º 08' 29" S / 34º 50' 46" W). Foram coletados cerca de 650 g da</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7333;left:128"><nobr>planta <i>Cymbopogon citratus </i>e colocadas em uma estufa a 50 °C por sete dias,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7364;left:128"><nobr>para secagem.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7395;left:181"><nobr>Após secagem, o material seco foi triturado em moinho forrageiro,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7426;left:128"><nobr>resultando em cerca de 150 gramas de matéria seca em pó. Destes, 75 g foram</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7457;left:128"><nobr>colocadas em um Erlenmeyer com 750 mL de etanol 95% (v/v), durante sete</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7488;left:128"><nobr>dias, em <b><span class="goohl0">temperatura ambiente</span></B> e ao abrigo de luz. Passados os sete dias, o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7519;left:128"><nobr>extrato foi então filtrado em filtro de papel e levado para rotaevaporador</nobr></div> <div style="position:absolute;top:7550;left:128"><nobr>(Rotavapor® R-100 Büchi, Suíça) para secagem e obtenção do extrato bruto. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:7747;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=7><b>Page 7</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:8963;left:799"><nobr>8</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:8965;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:7942;left:128"><nobr>2.2 CARACTERIZAÇÃO FITOQUÍMICA DO EXTRATO VEGETAL</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:7974;left:181"><nobr>Foram realizados diversos testes para identificar compostos no extrato de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8004;left:128"><nobr>capim-santo. O teste para flavonoides envolveu a adição de 5,0 mg de extrato a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8036;left:128"><nobr>um tubo de ensaio com fita de magnésio e ácido clorídrico concentrado,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8067;left:128"><nobr>observando-se efervescência e coloração parda ou vermelha. O teste para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8098;left:128"><nobr>glicosídeos consistiu na solubilização do extrato em solvente orgânico, seguido</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8129;left:128"><nobr>pela adição de hidróxido de amônio, indicado pela coloração levemente</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8160;left:128"><nobr>vermelha. O teste para saponinas envolveu a mistura do extrato com clorofórmio</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8191;left:128"><nobr>e água destilada, observando-se a formação de espuma persistente para indicar</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8222;left:128"><nobr>a presença de saponinas. Para identificar taninos, o extrato foi misturado com</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8253;left:128"><nobr>solução alcoólica de FeCl₃, evidenciando precipitado azul para taninos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8285;left:128"><nobr>hidrolisáveis e verde para taninos condensados. Por fim, o teste para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8316;left:128"><nobr>esteroides/triterpenoides, realizado pela reação de Lieberman-Burchard,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8347;left:128"><nobr>resultou em coloração azul evanescente seguida de verde para indicar a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8378;left:128"><nobr>presença desses compostos.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:8440;left:128"><nobr>2.3 ESPECTROSCOPIA DE INFRAVERMELHO COM TRANSFORMADA DE</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8471;left:128"><nobr>FOURIER (FTIR)</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:8502;left:181"><nobr>O espectrômetro de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR)</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8533;left:128"><nobr>com Reflectância Total Atenuada (ATR) modelo Cary 630 (Agilent), foi utilizado</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8564;left:128"><nobr>para verificar a interação de grupos funcionais do extrato bruto de forma isolada</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8595;left:128"><nobr>através do software MicroLab. As amostras foram obtidas em um número de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8626;left:128"><nobr>onda de 650 a 4000 cm-1 usando uma velocidade de 0,50 cm/s. Uma alíquota</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8657;left:128"><nobr>do extrato bruto foi colocada diretamente, sem diluição prévia, no leitor do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8688;left:128"><nobr>aparelho para a análise. Após a leitura, os dados foram plotados no GraphPad</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8719;left:128"><nobr>Prism.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:8781;left:128"><nobr>2.4 QUANTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES PELO MÉTODO DNS</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:8812;left:181"><nobr>A metodologia utilizada neste trabalho foi adaptada de Bernfeld (1955),</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8844;left:128"><nobr>testadas diferentes diluições feitas com o extrato bruto utilizando metanol como</nobr></div> <div style="position:absolute;top:8875;left:128"><nobr>solvente. O extrato foi dissolvido em 30 mL de metanol, que resultou numa </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:9009;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=8><b>Page 8</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:10225;left:799"><nobr>9</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:10227;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:9204;left:128"><nobr>concentração de 100 mg/30 mL, ou 3,3 mg/mL. Utilizaram-se inicialmente as</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9236;left:128"><nobr>diluições 1/1, 1/2 e 1/3. É importante notar que neste método de preparação as</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9266;left:128"><nobr>amostras 1/1, 1/2 e 1/3 de concentração tinham uma quantidade considerável de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9298;left:128"><nobr>metanol, sendo necessário verificar se o metanol interferiu na análise.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9329;left:181"><nobr>Realizou-se a reação em tubos de microcentrífuga de 1,5 mL, adicionando</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9360;left:128"><nobr>200 µL das soluções padrão ou da solução de extrato e 100 µL do reagente DNS</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9391;left:128"><nobr>e aqueceu-se a 90 °C por 15 min. Resfriou-se em banho de gelo até a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9422;left:128"><nobr><b><span class="goohl0">temperatura ambiente</span></B> (28 °C) e foi adicionado 900 μL de água destilada para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9453;left:128"><nobr>realizar a leitura. A leitura das amostras foi realizada na absorbância de 540 nm</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9484;left:128"><nobr>no espectrofotômetro. O branco da análise foi preparado com metanol ao invés</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9515;left:128"><nobr>da amostra, seguindo o mesmo procedimento. Para a realização da curva padrão</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9546;left:128"><nobr>foi feita diferentes diluições de glicose.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:9608;left:128"><nobr>2.5 DETERMINAÇÃO DO POTENCIAL ANTIOXIDANTE PELO MÉTODO DPPH</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:9639;left:181"><nobr>No teste, utilizou-se placas de 96 poços com fundo plano, onde se</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9667;left:128"><nobr>adicionou 100 μL de amostra em cada poço, incluindo o controle positivo. Em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9701;left:128"><nobr>seguida, em um ambiente com pouca luz, adicionamos 100 μL de uma solução</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9732;left:128"><nobr>de DPPH (Sigma-Aldrich) com concentração de 0,3 mM em cada poço. Para o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9760;left:128"><nobr>controle negativo foi utilizado 100 μL da solução DPPH 0,3 mM e 100 μL de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9794;left:128"><nobr>metanol. A placa permaneceu no escuro, sem agitação, por 30 minutos.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9825;left:128"><nobr>Posteriormente, as absorbâncias foram medidas a 517 nm usando um leitor de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9857;left:128"><nobr>microplacas multidetector Biotek modelo Synergy HT. A porcentagem de inibição</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9888;left:128"><nobr>(%I) (ou porcentagem de sequestro de radicais livres) foi então calculada com</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9919;left:128"><nobr>base nos valores obtidos a partir do equipamento para cada amostra usando a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9950;left:128"><nobr>Equação 1.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:9981;left:181"><nobr>Equação 1 - Equação da porcentagem de sequestro de radicais livres</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10055;left:128"><nobr>%𝑆𝐿𝑅𝑜𝑢%𝐼 = [</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10041;left:248"><nobr>(𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎𝑑𝑜𝐶𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙𝑒 − 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎𝑑𝑎𝐴𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎)</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10067;left:362"><nobr>𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎𝑑𝑜𝐶𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙𝑒</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10055;left:667"><nobr>] × 100 </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:10271;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=9><b>Page 9</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:11487;left:790"><nobr>10</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:11489;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:10466;left:181"><nobr>A partir dos valores de porcentagem de inibição (%I) foi possível mensurar</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10498;left:128"><nobr>concentração necessária para atingir a IC₅₀, referente a concentração</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10529;left:128"><nobr>necessária para reduzir em 50% a concentração inicial do radical DPPH em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10560;left:128"><nobr>solução. A IC₅₀ foi calculada a partir da plotagem de gráfico, onde %I representa</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10592;left:128"><nobr>o eixo Y e as concentrações testadas, o eixo X. Foi traçada uma regressão não</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10623;left:128"><nobr>linear a partir do gráfico e obtido o valor da IC₅₀ com auxílio do software</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10655;left:128"><nobr>GraphPad Prism.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:10717;left:128"><nobr>2.6 DETERMINAÇÃO DO POTENCIAL HIDROGENIÔNICO</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:10748;left:181"><nobr>Para determinação do potencial hidrogeniônico (pH) utilizou-se um</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10779;left:128"><nobr>medidor de pH de Bancada (modelo mPA-210, MS Tecnopon, Piracicaba, SP,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10810;left:128"><nobr>Brasil). Os diluidores foram testados diretamente no aparelho e para a aferição</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10841;left:128"><nobr>do extrato, foi usada uma solução mãe do extrato concentrado a 5,0 mg/mL,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10872;left:128"><nobr>diluída em TRIS, a mesma usada para formação dos grupos experimentais.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:10934;left:128"><nobr>2.7 DETERMINAÇÃO DA OSMOLARIDADE DOS DILUIDORES</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:10965;left:181"><nobr>A análise da osmolaridade dos diluidores experimentais e do diluidor</nobr></div> <div style="position:absolute;top:10996;left:128"><nobr>controle foram realizadas no Laboratório de Andrologia (ANDROLAB), no</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11027;left:128"><nobr>Departamento de Medicina Veterinária da UFRPE, através do osmômetro de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11058;left:128"><nobr>pressão de vapor (modelo 5600, Wescor, Logan, UT, USA). Foram colocados 10</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11086;left:128"><nobr>μL de cada diluidor em uma membrana semipermeável e realizada a leitura em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11120;left:128"><nobr>miliosmoles por quilograma (mOsmol/kg).</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:11182;left:128"><nobr>2.8 DELINEAMENTO EXPERIMENTAL DOS TESTES COM EXTRATO BRUTO</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:11213;left:181"><nobr>Inicialmente, foram produzidos diluidores para a congelação de sêmen. O</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11245;left:128"><nobr>grupo controle consistiu na solução TRIS [3,065 g de TRIS-(hidroximetil)-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11276;left:128"><nobr>aminometano; 2,024 g de ácido cítrico; 1,488 g de frutose; 100 mL de água</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11307;left:128"><nobr>destilada], acrescido de 20% de gema de ovo e 5% de glicerol. Uma solução</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11338;left:128"><nobr>mãe de extrato bruto, diluída em TRIS, foi preparada, com concentração final de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11369;left:128"><nobr>extrato concentrado a 5,0 mg/mL. Essa solução foi utilizada na formação dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11400;left:128"><nobr>grupos experimentais, nos quais diferentes porcentagens do extrato bruto de </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:11533;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=10><b>Page 10</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:12749;left:790"><nobr>11</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:12751;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:11728;left:128"><nobr>capim-santo (5,0 mg/mL) foram adicionadas ao diluidor padrão, resultando em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11760;left:128"><nobr>três grupos experimentais, além do controle: TG (Grupo Controle): TRIS + 20%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11790;left:128"><nobr>de gema de ovo + 5% de glicerol (Tris-gema); TGE 1: TRIS-gema + 1% do extrato</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11822;left:128"><nobr>bruto de capim-santo; TGE 5: TRIS-gema + 5% do extrato bruto de capim-santo;</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11853;left:128"><nobr>TGE 10: TRIS-gema + 10% do extrato bruto de capim-santo.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:11915;left:128"><nobr>2.9 TESTE DE REFRIGERAÇÃO DOS ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMÁRIOS</nobr></div> <div style="position:absolute;top:11946;left:128"><nobr>BOVINO</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:11977;left:181"><nobr>Os espermatozoides foram obtidos de complexos testículos-epidídimos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12008;left:128"><nobr>(CTE) doados por um abatedouro localizado na cidade de Santa Rita, Paraíba</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12039;left:128"><nobr>(7° 06' 50" S 34° 58' 40" O), ao Laboratório de Biotecnologia em Reprodução</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12070;left:128"><nobr>Animal (LABRA). Os epidídimos foram isolados do CTE nas instalações do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12101;left:128"><nobr>próprio abatedouro, e posteriormente transportados ao laboratório.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12132;left:181"><nobr>Os epidídimos foram destacados do complexo testículo-epidídimo,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12163;left:128"><nobr>dissecados e submetidos ao isolamento da cauda do epidídimo. Na sequência</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12194;left:128"><nobr>foram colocados em sacolas plásticas e lacrados para os objetos de transporte</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12225;left:128"><nobr>a serem testados. O transporte foi realizado em uma caixa de poliestireno,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12256;left:128"><nobr>comumente conhecida como caixa de isopor, sem adição de água, a <b><span class="goohl0">temperatura</span></B></nobr><b><span class="goohl0"></span></B></div><b><span class="goohl0"> </span></B><div style="position:absolute;top:12287;left:128"><b><span class="goohl0"></span></B><nobr><b><span class="goohl0">ambiente</span></B>. Todos os epidídimos foram colocados em sacos plásticos e isolados</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12318;left:128"><nobr>para que não houvesse contato direto com o meio de transporte.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:12381;left:128"><nobr><b>2.9.1 Recuperação dos Espermatozoides Epididimários</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:12412;left:181"><nobr>Para a recuperação dos espermatozoides foi usada a técnica de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12443;left:128"><nobr>flutuação, onde se realizou cortes seriados com lâmina de bisturi na ponta da</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12474;left:128"><nobr>cauda e colocados em placas de Petri, contendo 2,0 mL de soro fisiológico</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12505;left:128"><nobr>estéril, aquecido a 37 °C.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12536;left:181"><nobr>Amostras com motilidade maior que 50% foram aprovadas para o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12567;left:128"><nobr>experimento e realizou-se um pool com as mesmas e depois foi feita</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12598;left:128"><nobr>homogeneização da amostra. Na sequência, o <i>pool </i>já homogeneizado foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12629;left:128"><nobr>separado em tubo tipo <i>falcon </i>de 15 mL e levado à centrifugação (3000 rpm/5</nobr></div> <div style="position:absolute;top:12660;left:128"><nobr>minutos) para concentração das células espermáticas e retirada do </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:12795;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=11><b>Page 11</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:14011;left:790"><nobr>12</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:14013;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:12990;left:128"><nobr>sobrenadante. Posteriormente, foi retirado do precipitado (<i>pellet</i>) gerado 100 μL</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13022;left:128"><nobr>e distribuídos em tubos de microcentrífuga de 1,5 mL nos quais estavam os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13052;left:128"><nobr>diluidores que continha várias concentrações diferentes de extrato de capim-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13084;left:128"><nobr>santo (1%, 5% e 10%), e ao grupo controle. Os <i>pools </i>foram avaliados quanto à</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13115;left:128"><nobr>motilidade, vigor, integridade e funcionalidade de membrana, assim como o teste</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13146;left:128"><nobr>de morfologia espermática após a centrifugação e os grupos experimentais e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13177;left:128"><nobr>controle, foram analisados nos momentos 0 h, 24 h e 48 h pós-refrigeração a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13208;left:128"><nobr>5 °C.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:13270;left:128"><nobr><b>2.9.2 Avaliações Espermáticas</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:13301;left:181"><nobr>A avaliação da motilidade dos espermatozoides foi realizada de forma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13332;left:128"><nobr>subjetiva e expressa como uma porcentagem, variando de 0% a 100%. Isso foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13363;left:128"><nobr>realizado utilizando um microscópio óptico (Químis, São Paulo) com uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13394;left:128"><nobr>objetiva de 40x. Para tal, 10 µL da amostra foi colocado entre uma lâmina e uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13425;left:128"><nobr>lamínula, e a motilidade foi avaliada por dois avaliadores, com a média dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13456;left:128"><nobr>resultados sendo registrada.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13487;left:181"><nobr>Para a avaliação da morfologia espermática foi utilizado a técnica de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13518;left:128"><nobr>coloração com o corante rosa bengala. Inicialmente foi feito um estiraço com</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13549;left:128"><nobr>uma gota de sêmen e colocado para secar. Quando seco o estiraço, foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13577;left:128"><nobr>acrescentado 20 μL do corante sobre a lâmina e espalhado sobre a mesma com</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13611;left:128"><nobr>auxílio de uma ponteira de pipeta descartável. Após um período de 5 min</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13643;left:128"><nobr>mergulhou-se a lâmina em água destilada e separou para secagem e posterior</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13674;left:128"><nobr>contagem com os espermatozoides corados na cor rosa para uma melhor</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13705;left:128"><nobr>identificação de suas alterações morfológicas.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13736;left:181"><nobr>Para o teste de integridade da membrana plasmática foi feito utilizando a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13767;left:128"><nobr>dupla coloração com os corantes eosina e nigrosina (CBRA, 2013). As amostras</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13798;left:128"><nobr>para esse teste foram preparadas da seguinte maneira: 50 µL da solução eosina-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13829;left:128"><nobr>nigrosina, 25 µL de soro e 25 µL de sêmen de cada grupo foram misturados.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13860;left:128"><nobr>Posteriormente, foram estendidos (estiraço) e contados 200 espermatozoides.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13891;left:128"><nobr>Espermatozoides que aparecem com coloração rosa indicam uma membrana</nobr></div> <div style="position:absolute;top:13922;left:128"><nobr>danificada, que permitiu a entrada da eosina, conferindo uma coloração rosa aos </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:14057;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=12><b>Page 12</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:15273;left:790"><nobr>13</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:15275;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:14252;left:128"><nobr>espermatozoides, indicando danos na membrana. As células foram analisadas</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14284;left:128"><nobr>por dois avaliadores, com a média de espermatozoides corados sendo registrada</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14314;left:128"><nobr>como resultado.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14346;left:181"><nobr>O teste hiposmótico (HOST) visa avaliar a funcionalidade da membrana</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14377;left:128"><nobr>plasmática, considerando a capacidade de manter o equilíbrio osmótico entre o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14408;left:128"><nobr>ambiente dentro e fora da célula (CBRA, 2013). Para realizar o teste, foram</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14439;left:128"><nobr>combinados 10 µL de cada grupo experimental com 100 µL de uma solução</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14470;left:128"><nobr>hiposmótica (com osmolaridade de 50 mOsm/Kg H2O) em um microtubo. Essa</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14501;left:128"><nobr>mistura foi incubada em banho-maria a 37 °C por 30 minutos. Após a incubação,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14532;left:128"><nobr>adicionou-se 50 µL de uma solução formol salina para interromper a reação</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14563;left:128"><nobr>osmótica. As membranas funcionais têm a capacidade de absorver água do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14594;left:128"><nobr>ambiente, o que leva ao dobramento da cauda do espermatozoide. A análise foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14625;left:128"><nobr>conduzida da seguinte maneira: 10 µL de cada solução foram colocados em uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14656;left:128"><nobr>lâmina, cobertos com uma lamínula e examinados sob um microscópio óptico</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14687;left:128"><nobr>com uma objetiva de 40x. Foram contadas 200 células, analisadas por dois</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14718;left:128"><nobr>avaliadores, com a média de espermatozoides com cauda enrolada sendo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14749;left:128"><nobr>registrada como resultado.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:14811;left:128"><nobr>2.10 ANÁLISE ESTATÍSTICA</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:14842;left:181"><nobr>Os dados foram avaliados pelo teste de Shapiro-Wilk para testar a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14873;left:128"><nobr>normalidade dos dados. Foi utilizado o teste ANOVA de medidas repetidas (RM</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14905;left:128"><nobr>ANOVA), seguida do pós-teste de Tukey (p<0,05) para comparações entre os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14936;left:128"><nobr>tempos do mesmo tratamento e comparações entre os tratamentos em um</nobr></div> <div style="position:absolute;top:14967;left:128"><nobr>mesmo tempo pelo software GraphPad Prism 9.5.1.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:15029;left:128"><nobr><b>3 RESULTADOS E DISCUSSÃO</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15060;left:128"><nobr>3.1 CARACTERIZAÇÃO FITOQUÍMICA DO EXTRATO VEGETAL</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:15091;left:181"><nobr>O <i>screening </i>fitoquímico qualitativo revelou a presença de flavonoides,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15122;left:128"><nobr>glicosídeos, taninos e esteroides no extrato de capim-santo (Quadro 1),</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15153;left:128"><nobr>corroborando estudos prévios (Ekpenyong; Akpan; Nyoh, 2015; Lawal <i>et al</i>.,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15184;left:128"><nobr>2017; Silva <i>et al</i>., 2010). Devido às diversas aplicações etnofarmacológicas </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:15319;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=13><b>Page 13</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:16535;left:790"><nobr>14</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:16537;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:15514;left:128"><nobr>dessa planta, pesquisas têm explorado a variação na composição química dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15546;left:128"><nobr>óleos essenciais e extratos, evidenciando a presença de taninos, esteróis,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15576;left:128"><nobr>terpenoides, fenóis, cetonas, flavonoides e açúcares.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:15638;left:193"><nobr>Quadro 1. Prospecção fitoquímica dos dois tipos de extratos de capim-santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15663;left:293"><nobr><b>Flavonoides</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15663;left:408"><nobr><b>Saponinas</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15663;left:511"><nobr><b>Glicosídeos</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15663;left:627"><nobr><b>Taninos</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15663;left:717"><nobr><b>Esteróis</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:118"><nobr><b>Extrato capim-santo</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:332"><nobr><b>+</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:443"><nobr><b>-</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:550"><nobr><b>+</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:651"><nobr><b>+</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15695;left:742"><nobr><b>+</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15720;left:169"><nobr>O símbolo "+" representa a presença, enquanto o símbolo "-" indica a ausência dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15737;left:283"><nobr>componentes metabólicos. Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:15786;left:181"><nobr>Estudos indicam que flavonoides, glicosídeos e taninos possuem</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15817;left:128"><nobr>atividades</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15817;left:245"><nobr>farmacológicas,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15817;left:406"><nobr>incluindo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15817;left:513"><nobr>propriedades</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15817;left:654"><nobr>antioxidantes,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15848;left:128"><nobr>antimicrobianas e anti-inflamatórias (Chang; Alasalvar; Shahidi, 2019; Shen <i>et</i></nobr></div> <div style="position:absolute;top:15879;left:128"><nobr><i>al</i>., 2022; Wang <i>et al</i>., 2018). Considerando que a produção excessiva de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15910;left:128"><nobr>espécies reativas de oxigênio (ERO) pode prejudicar a fertilidade e viabilidade</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15941;left:128"><nobr>espermática, a presença desses compostos no extrato de capim-santo sugere</nobr></div> <div style="position:absolute;top:15972;left:128"><nobr>um potencial benéfico em diluidores espermáticos. Adicionalmente, os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16003;left:128"><nobr>fitoesteróis presentes, similares ao colesterol nas células de mamíferos,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16034;left:128"><nobr>destacam-se como elementos vitais nas membranas celulares, oferecendo uma</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16065;left:128"><nobr>alternativa viável para melhorar os parâmetros espermáticos e a fertilidade em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16096;left:128"><nobr>diluidores (Liman <i>et al</i>., 2022; Rajoriya <i>et al</i>., 2020; Wang <i>et al</i>., 2022).</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:16158;left:128"><nobr>3.2 ESPECTROSCOPIA DE INFRAVERMELHO COM TRANSFORMADA DE</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16190;left:128"><nobr>FOURIER (FTIR)</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:16221;left:181"><nobr>O FTIR mostrou a presença de grupos funcionais característicos dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16252;left:128"><nobr>metabólitos secundários. O espectro resultante do teste está exposto na Figura</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16283;left:128"><nobr>1. Bandas de absorção entre 1800 cm⁻¹ e 1600 cm⁻¹ mostram a presença de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16315;left:128"><nobr>carbonila (C=O), e hidroxila (OH) na faixa de 3300 cm⁻¹, característicos de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16346;left:128"><nobr>flavonoides e taninos. Um intenso pico de absorbância entre 1020 cm⁻¹ e 1300</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16378;left:128"><nobr>cm⁻¹ mostra a presença de éter (C-O-C), característicos de glicosídeos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:16409;left:128"><nobr>(Megawati <i>et al</i>., 2023). </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:16581;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=14><b>Page 14</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:17797;left:790"><nobr>15</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:17799;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:16776;left:259"><nobr>Figura 1. Espectro FTIR do extrato bruto de capim-santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17065;left:374"><nobr>Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:17114;left:181"><nobr>Esses resultados corroboram com os do <i>screening </i>fitoquímico feito</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17145;left:128"><nobr>previamente, comprovando a presença dos metabólitos secundários no extrato</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17176;left:128"><nobr>testado.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:17239;left:128"><nobr>3.3 QUANTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES PELO MÉTODO DNS</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:17269;left:181"><nobr>Na Tabela 1 é mostrado o resultado da quantificação de açúcares</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17301;left:128"><nobr>redutores do extrato bruto de capim-santo. A concentração de moléculas totais</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17332;left:128"><nobr>no extrato etanólico de capim-santo era 3,33 mg/mL. Destes, foi observado que</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17363;left:128"><nobr>1,036 mg representaram a presença de açúcares redutores, correspondendo a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17394;left:128"><nobr>aproximadamente 31% da composição da amostra.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:17455;left:178"><nobr>Tabela 1. Quantidade de açúcares redutores presente no extrato de capim-santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17480;left:406"><nobr><b>Quantidade de açúcares redutores (%)</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:17512;left:121"><nobr><b>Extrato de Capim-Santo</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:17512;left:505"><nobr>31% ± 0,12</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17537;left:374"><nobr>Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:17586;left:181"><nobr>Diversos estudos relataram os efeitos positivos dos açúcares contidos nos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17617;left:128"><nobr>diluentes de sêmen sobre a viabilidade dos espermatozoides de mamíferos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17648;left:128"><nobr>(Moraes <i>et al</i>., 2021; Naing <i>et al</i>., 2010). Os açúcares desempenham um papel</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17679;left:128"><nobr>preponderante nos diluentes de sêmen, servindo como a principal fonte de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:17710;left:128"><nobr>energia para o espermatozoide. Os espermatozoides podem metabolizar </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:17843;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=15><b>Page 15</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:19059;left:790"><nobr>16</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:19061;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:18038;left:128"><nobr>açúcares, tais como glicose e frutose, ou seus metabólitos, através dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18070;left:128"><nobr>processos de glicólise e fosforilação oxidativa para suprir energia necessária</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18100;left:128"><nobr>para o seu metabolismo e atividade (Zhang <i>et al</i>., 2023). Estes mesmos possuem</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18132;left:128"><nobr>também função crioprotetoras, promovendo estabilização da membrana,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18163;left:128"><nobr>proteção ao choque térmico e desidratação (Whaley <i>et al</i>., 2021).</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:18225;left:128"><nobr>3.4 DETERMINAÇÃO DO POTENCIAL ANTIOXIDANTE PELO MÉTODO DPPH</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:18256;left:181"><nobr>A partir dos valores de inibição (%I) encontrado no experimento foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18287;left:128"><nobr>possível mensurar a IC₅₀, referente a concentração necessária para reduzir em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18318;left:128"><nobr>50% a concentração inicial do radical DPPH em solução (Figura 2).</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:18380;left:130"><nobr>Figura 2. Gráfico da relação entre a %I e as concentrações do extrato bruto de capim-santo e o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18397;left:396"><nobr>IC₅₀ do mesmo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18667;left:374"><nobr>Fonte: Autores, 2023<font style="font-size:16px">.</font></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:18717;left:181"><nobr>Nota-se que entre as concentrações de 0,5 mg/mL e 1 mg/mL não há</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18748;left:128"><nobr>diferença significativa, o que pode ter ocorrido devido à saturação da atividade</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18779;left:128"><nobr>antioxidante do extrato. A partir da equação da curva padrão de Trolox foi</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18810;left:128"><nobr>possível calcular os valores de equivalência ao Trolox (TEAC) de diferentes</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18841;left:128"><nobr>concentrações do extrato (Tabela 2). Os resultados obtidos a partir do teste de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18872;left:128"><nobr>potencial antioxidante pelo método DPPH, demonstram que o extrato bruto de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18903;left:128"><nobr>capim-santo tem um potencial antioxidante considerável, assim como mostraram</nobr></div> <div style="position:absolute;top:18934;left:128"><nobr>Oliveira <i>et al</i>. (2019) e Balakrishnan, Paramasivam; Arulkumar (2014). </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:19105;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=16><b>Page 16</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:20321;left:790"><nobr>17</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:20323;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:19300;left:181"><nobr>O Trolox é um antioxidante altamente eficaz e uma substância análoga à</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19332;left:128"><nobr>vitamina E, solúvel em água. Sua utilização é comum em pesquisas científicas</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19362;left:128"><nobr>para investigar o estresse oxidativo e seus efeitos nos sistemas biológicos (Atiq</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19394;left:128"><nobr><i>et al</i>., 2023). Quando usado em meio diluidor de sêmen, o Trolox pode causar</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19425;left:128"><nobr>efeitos benéficos como melhora na integridade de membrana, motilidade,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19456;left:128"><nobr>estrutura mitocondrial e índices de estresse oxidativo (Khellouf <i>et al.</i>, 2018;</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19487;left:128"><nobr>Soares <i>et al.</i>, 2015; Yuan <i>et al.</i>, 2022).</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:19548;left:141"><nobr>Tabela 2. Potencial antioxidante pelo método do Radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazila (DPPH)</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19565;left:325"><nobr>para o extrato bruto de Capim Santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19583;left:171"><nobr><b>Concentração do extrato bruto</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:19583;left:575"><nobr><b>TEAC (mM)</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:19621;left:241"><nobr>0,05 mg/mL</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19621;left:592"><nobr>0,0229</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19653;left:245"><nobr>0,1 mg/mL</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19653;left:592"><nobr>0,0471</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19684;left:245"><nobr>0,5 mg/mL</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19684;left:592"><nobr>0,1013</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19716;left:245"><nobr>1,0 mg/mL</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19716;left:592"><nobr>0,1012</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19741;left:374"><nobr>Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:19790;left:181"><nobr>Dada a sua equivalência ao Trolox, o extrato bruto de capim-santo pode</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19821;left:128"><nobr>ser usado na tentativa de reduzir os danos oxidativos na célula espermática.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:19883;left:128"><nobr>3.5 DETERMINAÇÃO DO POTENCIAL HIDROGENIÔNICO</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:19914;left:181"><nobr>A Tabela 3 apresenta os resultados da medição do pH nos diluidores e na</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19946;left:128"><nobr>solução mãe de extrato concentrada usados no experimento. O pH influencia</nobr></div> <div style="position:absolute;top:19977;left:128"><nobr>diretamente na viabilidade espermática, sendo crucial manter uma faixa próxima</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20008;left:128"><nobr>ao neutro. Os valores encontrados nos diluidores estão dentro da faixa ideal (pH</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20039;left:128"><nobr>6,5 a 7,5) associada a melhores características de motilidade, viabilidade e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20070;left:128"><nobr>atividade mitocondrial, conforme estudado por Contri <i>et al</i>. (2013). Esses</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20101;left:128"><nobr>resultados indicam condições favoráveis para a qualidade espermática no</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20132;left:128"><nobr>contexto do experimento. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:20367;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=17><b>Page 17</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:21583;left:790"><nobr>18</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:21585;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:20562;left:185"><nobr>Tabela 3. Valores de pH do diluidor tris-gema com ou sem adição de extrato de capim-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20579;left:428"><nobr>santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20603;left:283"><nobr><b>Diluidor</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:20603;left:615"><nobr><b>pH</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:20635;left:301"><nobr>TG</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20635;left:610"><nobr>6,78</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20666;left:283"><nobr>TGE 1%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20666;left:610"><nobr>6,87</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20698;left:283"><nobr>TGE 5%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20698;left:610"><nobr>6,87</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20733;left:279"><nobr>TGE 10%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20733;left:610"><nobr>6,90</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20771;left:244"><nobr>Solução mãe (5 g/L)</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20771;left:610"><nobr>5,77</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20799;left:401"><nobr>Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:20848;left:128"><nobr>3.6 DETERMINAÇÃO DA OSMOLARIDADE DOS DILUIDORES</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:20879;left:181"><nobr>Na análise da osmolaridade, observa-se uma diminuição à medida que a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20910;left:128"><nobr>quantidade de extrato aumenta, comparada à menor quantidade (Tabela 4).</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:20971;left:130"><nobr>Tabela 4. Valores de osmolaridade do diluidor tris-gema acrescido ou não de extrato de capim-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:20989;left:428"><nobr>santo</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21012;left:224"><nobr><b>Diluidor</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:21012;left:435"><nobr><b>Osmolaridade (mOsmol/kg)</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:21043;left:242"><nobr>TG</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21043;left:520"><nobr>984</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21073;left:224"><nobr>TGE 1%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21073;left:516"><nobr>1002</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21103;left:224"><nobr>TGE 5%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21103;left:520"><nobr>991</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21137;left:220"><nobr>TGE 10%</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21137;left:520"><nobr>940</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21164;left:374"><nobr>Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:21213;left:181"><nobr>No entanto, todos os valores permanecem próximos ao grupo controle. A</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21244;left:128"><nobr>osmolaridade é uma característica crucial do diluente, sendo a concentração de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21275;left:128"><nobr>solutos fundamental na eficácia da criopreservação de espermatozoides (Nang</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21307;left:128"><nobr><i>et al</i>., 2012). Notavelmente, a adição de extrato não interfere significativamente</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21338;left:128"><nobr>na osmolaridade do diluidor.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:21400;left:128"><nobr>3.7 AVALIAÇÕES ESPERMÁTICAS</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:21431;left:181"><nobr>Os valores médios da motilidade espermática nos diferentes grupos e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21462;left:128"><nobr>tempos testados estão expressos na figura 3. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:21629;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=18><b>Page 18</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:22845;left:790"><nobr>19</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:22847;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:21824;left:181"><nobr>A adição de extrato bruto de capim-santo obteve resultados semelhantes</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21856;left:128"><nobr>ao grupo controle (p> 0,05), além de não ter demonstrado diferença entre os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21886;left:128"><nobr>grupos testados em relação à motilidade. O tempo 0 h é a avaliação após o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21918;left:128"><nobr>período de refrigeração e estabilização em 5 °C, o que pode explicar a notável</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21949;left:128"><nobr>mudança entre a motilidade no tempo de 0 h e 24 h é que os espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:21980;left:128"><nobr>epididimários passam por diferentes estresses até a serem finalmente colocados</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22011;left:128"><nobr>nos diluidores (Bergstein-Galan <i>et al</i>., 2017), estando estes mais bem adaptados</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22042;left:128"><nobr>24 h pós-refrigeração e o decréscimo na motilidade acontece no tempo seguinte</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22073;left:128"><nobr>(48 h), como esperado.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:22134;left:147"><nobr>Figura 3. Motilidade espermática dos espermatozoides epididimários bovinos com ou sem</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22152;left:215"><nobr>adição do extrato de capim-santo nos tempos 0 h, 24 h e 48 h, a 5 °C</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22434;left:131"><nobr>0 h – Média da motilidade espermática em 0 h após curva de refrigeração a 5 °C; 24 h – Média</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22451;left:152"><nobr>da motilidade espermática em 24 h após refrigeração a 5 °C; 48 h – Média da motilidade</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22469;left:215"><nobr>espermática em 48 h após refrigeração a 5 °C. Fonte: Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:22518;left:181"><nobr>As características do movimento dos espermatozoides desempenham um</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22549;left:128"><nobr>papel crucial na fertilização, uma vez que a motilidade progressiva é fundamental</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22580;left:128"><nobr>para que o espermatozoide possa penetrar na zona pelúcida do óvulo, tanto em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22611;left:128"><nobr>condições naturais (<i>in vivo</i>) como em procedimentos de fertilização <i>in vitro</i>.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22642;left:181"><nobr>O espermatozoide precisa ser capaz de percorrer o caminho até o local</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22673;left:128"><nobr>onde ocorre a fertilização e permanecer viável no trato genital feminino até o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22704;left:128"><nobr>momento da ovulação. Ao mesmo tempo, ele deve estar em condições</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22735;left:128"><nobr>adequadas para fertilizar o óvulo com sucesso (Fernández-López <i>et al</i>., 2022;</nobr></div> <div style="position:absolute;top:22766;left:128"><nobr>Tardif <i>et al</i>., 1999). Baseado na observação deste parâmetro, pode-se indicar </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:22891;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=19><b>Page 19</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:24107;left:790"><nobr>20</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:24109;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:23086;left:128"><nobr>que espermatozoides epididimários necessitem de maior tempo para sua</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23118;left:128"><nobr>utilização, considerando o processo de diluição e refrigeração, se forem</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23148;left:128"><nobr>utilizados na IA com espermatozoide refrigerado.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23180;left:181"><nobr>Os valores médios de espermatozoides com a membrana espermática</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23211;left:128"><nobr>íntegra nos diferentes tempos testados estão expressos na figura 4.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:23272;left:173"><nobr>Figura 4. Percentual da integridade de membrana plasmática de espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23289;left:130"><nobr>epididimários bovinos com ou sem adição do extrato de capim-santo nos tempos 0 h, 24 h e 48</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23572;left:168"><nobr>h, a 5 °C </nobr></div> <div style="position:absolute;top:23589;left:133"><nobr>0 h – Média de espermatozoides íntegros (não corados) em 0 h após refrigeração a 5 °C; 24 h</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23603;left:135"><nobr>– Média de espermatozoides íntegros (não corados) em 24 h após refrigeração a 5 °C; 48 h –</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23623;left:141"><nobr>Média de espermatozoides íntegros (não corados) em 48 h após refrigeração a 5 °C. Fonte:</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23641;left:398"><nobr>Autores, 2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:23689;left:181"><nobr>A adição de extrato bruto de capim-santo obteve resultados semelhantes</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23721;left:128"><nobr>ao grupo controle (p> 0,05), além de não ter demonstrado diferenças</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23752;left:128"><nobr>significativas entre os grupos testados em relação à integridade de membrana</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23783;left:128"><nobr>plasmática. A diminuição na taxa de espermatozoides íntegros com o passar do</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23814;left:128"><nobr>tempo é esperada devido aos danos causados pela refrigeração (Crespilho <i>et</i></nobr></div> <div style="position:absolute;top:23845;left:128"><nobr><i>al.</i>, 2014).</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23876;left:181"><nobr>A avaliação de integridade da membrana plasmática é de bastante</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23907;left:128"><nobr>importância para a reprodução, uma vez que, segundo Oliveira (2013), a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23938;left:128"><nobr>integridade da membrana plasmática do espermatozoide é corriqueiramente</nobr></div> <div style="position:absolute;top:23969;left:128"><nobr>atrelada a maiores índices de fertilidade. Entretanto, é perceptível que o extrato</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24000;left:128"><nobr>de capim-santo, nas concentrações testadas, não desempenhou função</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24031;left:128"><nobr>protetora na integridade celular. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:24153;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=20><b>Page 20</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:25369;left:790"><nobr>21</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:25371;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:24348;left:181"><nobr>Os valores médios de espermatozoides com membrana plasmática</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24380;left:128"><nobr>funcional (cauda enrolada) nos diferentes tempos testados estão expressos na</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24410;left:128"><nobr>figura 5.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24442;left:181"><nobr>A adição de extrato bruto de capim-santo obteve resultados semelhantes</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24473;left:128"><nobr>ao grupo controle (p> 0,05), além de não ter demonstrado diferenças</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24504;left:128"><nobr>significativas entre os grupos testados em relação à funcionalidade de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24535;left:128"><nobr>membrana plasmática. No teste hiposmótico ocorre o mesmo observado na</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24566;left:128"><nobr>avaliação de motilidade, onde o tempo 24 h apresenta resultado um pouco</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24597;left:128"><nobr>melhor que o grupo 0 h, onde os espermatozoides estavam em processo de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24628;left:128"><nobr>adaptação ao meio.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:24689;left:162"><nobr>Figura 5. Percentual de funcionalidade da membrana plasmática de espermatozoides</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24706;left:130"><nobr>epididimários bovinos com ou sem adição do extrato de capim-santo nos tempos 0 h, 24 h e 48</nobr></div> <div style="position:absolute;top:24989;left:168"><nobr>h, a 5 °C</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25006;left:139"><nobr>0h – Média de espermatozoides funcionais (cauda enrolada) em 0h após refrigeração; 24h –</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25023;left:129"><nobr>Média de espermatozoides funcionais (cauda enrolada) em 24h após refrigeração; 48h – Média</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25040;left:141"><nobr>de espermatozoides funcionais (cauda enrolada) em 48h após refrigeração. Fonte: Autores,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25058;left:428"><nobr>2023.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:25107;left:181"><nobr>A avaliação da funcionalidade da membrana plasmática dos</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25138;left:128"><nobr>espermatozoides é de suma importância e deve ser incorporada como parte</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25169;left:128"><nobr>essencial da avaliação de sêmen criopreservado. Além disso, essa avaliação</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25200;left:128"><nobr>tem uma correlação significativa com a fertilidade de amostras de sêmen bovino</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25231;left:128"><nobr>congelado em programas de inseminação artificial (Martins <i>et al.</i>, 2015). </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:25415;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=21><b>Page 21</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:26631;left:790"><nobr>22</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:26633;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:25610;left:128"><nobr><b>6 CONSIDERAÇÕES FINAIS</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:25642;left:181"><nobr>O extrato bruto de capim-santo utilizado no presente trabalho apresenta</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25672;left:128"><nobr>diversos metabólitos secundários, como esteróis e flavonoides, além de possuir</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25704;left:128"><nobr>atividade antioxidante frente ao radical DPPH. Tais características torna-o</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25735;left:128"><nobr>interessante para ser usado na criopreservação de espermatozoides bovinos.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25766;left:181"><nobr>Entretanto, nas concentrações usadas neste trabalho, não foi possível</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25797;left:128"><nobr>observar diferenças significativas em relação ao diluidor padrão. Deste modo,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25828;left:128"><nobr>faz se necessário estudos mais aprofundados de suas características para</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25859;left:128"><nobr>chegar a uma concentração desejável que possa melhorar efetivamente os</nobr></div> <div style="position:absolute;top:25890;left:128"><nobr>parâmetros dos espermatozoides refrigerados. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:26677;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=22><b>Page 22</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:27893;left:790"><nobr>23</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:27895;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#c00000" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#c00000"> <div style="position:absolute;top:26872;left:382"><nobr><b>REFERÊNCIAS</b></nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:26914;left:144"><nobr>ALVES, P. <b>Taxa de desfrute - Scot Consultoria</b>. Disponível em:</nobr></div> <div style="position:absolute;top:26934;left:128"><nobr><https://www.scotconsultoria.com.br/noticias/artigos/23681/taxa-de-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:26955;left:128"><nobr>desfrute.htm>. Acesso em: 17 mar. 2023.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:26997;left:128"><nobr>ATIQ, A. <i>et al. </i>Vitamin E Analog Trolox Attenuates MPTP-Induced Parkinson’s</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27017;left:128"><nobr>Disease in Mice, Mitigating Oxidative Stress, Neuroinflammation, and Motor</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27038;left:128"><nobr>Impairment. <b>International Journal of Molecular Sciences</b>, v. 24, n. 12, p. 9942,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27059;left:128"><nobr>9 jun. 2023.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27100;left:128"><nobr>BALAKRISHNAN, B.; PARAMASIVAM, S.; ARULKUMAR, A. Evaluation of the</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27121;left:128"><nobr>lemongrass plant (<i>Cymbopogon citratus</i>) extracted in different solvents for</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27142;left:128"><nobr>antioxidant and antibacterial activity against human pathogens. <b>Asian Pacific</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:27162;left:128"><nobr><b>Journal of Tropical Disease</b>, v. 4, p. S134–S139, 2014.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27204;left:128"><nobr>BARUSELLI, P. S. <i>et al</i>. Evolução e perspectivas da inseminação artificial em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27224;left:128"><nobr>bovinos. <b>Revista Brasileira de Reprodução Animal, </b>v. 43, n. 2, p. 308-314,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27245;left:128"><nobr>2019.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27286;left:128"><nobr>BARUSELLI P.S., FERREIRA R.M., SÁ FILHO M.F., BÓ G.A. Review: Using</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27307;left:128"><nobr>artificial insemination v. natural service in beef herds. <b>Animal</b>, v.12, p.45-52,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27328;left:128"><nobr>2018.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27369;left:128"><nobr>BERGSTEIN-GALAN, T. G. <i>et al</i>. Espermatozoides epididimários: refrigeração e</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27390;left:128"><nobr>criopreservação. <b>Revista Brasileira de Reprodução Animal</b>, v. 41, p. 659-664,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27411;left:128"><nobr>2017.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27449;left:128"><nobr>BERNFELD, P. Amylase α and β. In: <b>Methods in Enzymology</b>, 1, 149-158.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27473;left:128"><nobr>1955.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27493;left:128"><nobr>http://dx.doi.org/10.1016/0076-6879(55)01021-5</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27535;left:128"><nobr>CBRA (COLÉGIO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL). <b>Manual para</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:27556;left:128"><nobr><b>exame andrológico e avaliação de sêmen animal: manual de orientação</b>.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27576;left:128"><nobr>Belo Horizonte, 2013.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27618;left:128"><nobr>CHANG, S. K.; ALASALVAR, C.; SHAHIDI, F. Superfruits: Phytochemicals,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27638;left:128"><nobr>antioxidant efficacies, and health effects – A comprehensive review. <b>Critical</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:27659;left:128"><nobr><b>Reviews in Food Science and Nutrition</b>, v. 59, n. 10, p. 1580–1604, 31 maio</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27680;left:128"><nobr>2019.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27721;left:128"><nobr>CONTRI, A. <i>et al. </i>Kinematic study on the effect of pH on bull sperm function.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27742;left:128"><nobr><b>Animal Reproduction Science</b>, v. 136, n. 4, p. 252–259, jan. 2013.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27783;left:128"><nobr>CRESPILHO, A. M. <i>et al. </i>Sperm fertility and viability following 48h of refrigeration:</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27804;left:128"><nobr>Evaluation of different extenders for the preservation of bull semen in liquid state.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:27825;left:128"><nobr><b>Animal Reproduction Science</b>, v. 146, n. 3–4, p. 126–133, maio 2014. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:27939;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=23><b>Page 23</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:29155;left:790"><nobr>24</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:29157;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:28134;left:128"><nobr>EKPENYONG, C. E.; AKPAN, E.; NYOH, A. Ethnopharmacology,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28155;left:128"><nobr>phytochemistry, and biological activities of Cymbopogon citratus (DC.) Stapf</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28176;left:128"><nobr>extracts. <b>Chinese Journal of Natural Medicines</b>, v. 13, n. 5, p. 321–337, maio</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28196;left:128"><nobr>2015.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28238;left:128"><nobr>FARIAS, C.F.A<b>. Estudo da eficácia da Aloe vera como crioprotetor vegetal</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:28259;left:128"><nobr><b>na criopreservação de espermatozoide caprino</b>. Dissertação (Mestrado em</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28279;left:128"><nobr>Ciência Animal) - Centro de Ciências Agrárias, Areia, 2020.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28321;left:128"><nobr>FERNÁNDEZ-LÓPEZ, P. <i>et al. </i>Predicting fertility from sperm motility landscapes.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28341;left:128"><nobr><b>Communications Biology</b>, v. 5, n. 1, p. 1027, 28 set. 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28383;left:128"><nobr>IBGE. <b>Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística</b>. Pesquisa da Pecuária</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28404;left:128"><nobr>Municipal (PPM), 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28445;left:128"><nobr>JOHNSON, S. K.; JONES, R. D. A Stochastic Model to Compare Breeding</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28466;left:128"><nobr>System Costs for Synchronization of Estrus and Artificial Insemination to Natural</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28486;left:128"><nobr>Service. <b>The Professional Animal Scientist</b>, v. 24, n. 6, p. 588–595, dez. 2008.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28528;left:128"><nobr>KHELLOUF, A. <i>et al. </i>The Complementary Effect of Cholesterol and Vitamin E</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28548;left:128"><nobr>Preloaded in Cyclodextrins on Frozen Bovine Semen: Motility Parameters,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28569;left:128"><nobr>Membrane Integrity and Lipid Peroxidation. <b>Cryo Letters</b>, v. 39, n. 2, p. 113–120,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28590;left:128"><nobr>2018.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28631;left:128"><nobr>LAWAL, O. A. <i>et al. </i>Cymbopogon citratus. <i>Em</i>: <b>Medicinal Spices and</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:28652;left:128"><nobr><b>Vegetables from Africa: Therapeutic Potential Against Metabolic,</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:28673;left:128"><nobr><b>Inflammatory, Infectious and Systemic Diseases</b>. [s.l.] Elsevier Inc., 2017. p.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28693;left:128"><nobr>397–423.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28735;left:128"><nobr>LIMAN, M. S. <i>et al. </i>Potential Use of Tannin Extracts as Additives in Semen</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28755;left:128"><nobr>Destined for Cryopreservation: A Review. <b>Animals</b>, v. 12, n. 9, p. 1130, 28 abr.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28776;left:128"><nobr>2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28818;left:128"><nobr>LONERGAN, P. Review: Historical and futuristic developments in bovine semen</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28838;left:128"><nobr>technology. <b>Animal</b>, v. 12, p. s4–s18, 2018.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28880;left:128"><nobr>MARTINS, C. F. <i>et al. </i><b>Atlas de Morfologia Espermática Bovina</b>. 2016.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28921;left:128"><nobr>MARTINS, L. F. <i>et al. </i>UTILIZAÇÃO DE DIFERENTES VOLUMES DE SÊMEN</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28942;left:128"><nobr>NA REALIZAÇÃO DO TESTE HIPOSMÓTICO EM TOUROS ADULTOS DA</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28962;left:128"><nobr>RAÇA NELORE. <b>Arquivos de Ciências Veterinárias e Zoologia da UNIPAR</b>,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:28983;left:128"><nobr>v. 18, n. 1, 2015.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29025;left:128"><nobr>MEGAWATI, E. <i>et al. </i>Phytochemical Analysis by FTIR of Zanthoxylum</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29045;left:128"><nobr>Acanthopodium, DC Fruit Ethanol Extract, N-hexan, Ethyl Acetate and Water</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29066;left:128"><nobr>Fraction. <b>Medical Archives</b>, v. 77, n. 3, p. 183, 2023. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:29201;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=24><b>Page 24</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:30417;left:790"><nobr>25</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:30419;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:29396;left:128"><nobr>MOORE, S. G.; HASLER, J. F. A 100-Year Review: Reproductive technologies</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29417;left:128"><nobr>in dairy science. <b>Journal of Dairy Science</b>, v. 100, n. 12, p. 10314–10331, 2017.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29458;left:128"><nobr>MORAES, C. R. <i>et al</i>. Effect of glucose concentration and cryopreservation on</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29479;left:128"><nobr>mitochondrial functions of bull spermatozoa and relationship with sire conception</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29500;left:128"><nobr>rate. <b>Animal Reproduction Science</b>, v. 230, p. 106779, 2021.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29541;left:128"><nobr>NAING, S. W. <i>et al</i>. Effect of sugars on characteristics of Boer goat semen after</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29562;left:128"><nobr>cryopreservation. <b>Animal reproduction science</b>, v. 122, n. 1-2, p. 23-28, 2010.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29603;left:128"><nobr>NANG, C. F. <i>et al. </i>Bovine serum albumin: survival and osmolarity effect in bovine</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29624;left:128"><nobr>spermatozoa stored above freezing point. <b>Andrologia</b>, v. 44, p. 447–453, 2012.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29666;left:128"><nobr>NASCIMENTO, V.; BATISTA FILHO, M.; DIAS, M. Evolução do efetivo de</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29686;left:128"><nobr>bovinos no Brasil, estado de Goiás e município de Jataí (GO). <b>Enciclopédia</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:29707;left:128"><nobr><b>Biosfera</b>, v. 13, n. 23, 2016.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29748;left:128"><nobr>OLIVEIRA, G.C. <i>et al</i>. Criopreservação do sêmen equino: uma revisão. <b>Revista</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:29769;left:128"><nobr><b>Brasileira de Reprodução Animal</b>, v. 37, n. 1, p. 23-28, 2013.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29810;left:128"><nobr>OLIVEIRA, L. <i>et al. </i>Estudo da atividade antioxidante do extrato bruto</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29831;left:128"><nobr>hidroalcoólico do capim-cidreira (<i>Cymbopogon citratus</i>) pelo método DPPH.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29852;left:128"><nobr><b>Enciclopédia Biosfera</b>, v. 16, n. 29, p. 2034–2042, 2019.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29893;left:128"><nobr>PFEIFER, L. F. M. et al. Economic simulation of mating alternatives in beef cattle.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29914;left:128"><nobr><b>A Hora Veterinária</b>, v. 29, n. 173, p. 32-37, 2010.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29956;left:128"><nobr>RAJORIYA, J. S. <i>et al. </i>Exogenous cholesterol prevents cryocapacitation‐like</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29976;left:128"><nobr>changes, membrane fluidity, and enhances in vitro fertility in bubaline</nobr></div> <div style="position:absolute;top:29997;left:128"><nobr>spermatozoa. <b>Reproduction in Domestic Animals</b>, v. 55, n. 6, p. 726–736,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30018;left:128"><nobr>2020.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30059;left:128"><nobr>REHAGRO. <b>Reprodução bovina: monta natural, inseminação artificial e</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:30080;left:128"><nobr><b>IATF</b>.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30080;left:233"><nobr>Disponível</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30080;left:379"><nobr>em:</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30080;left:470"><nobr><https://rehagro.com.br/blog/manejo-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30101;left:128"><nobr>reprodutivo/#:~:text=A%20t>. Acesso em: 30 mar. 2023.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30142;left:128"><nobr>ROS-SANTAELLA, J. L.; PINTUS, E. Plant extracts as alternative additives for</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30163;left:128"><nobr>sperm preservation. <b>Antioxidants</b>, v. 10, n. 5, p. 772, 2021.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30204;left:128"><nobr>SAWADOGO, I. <i>et al. </i>Antifungal and Antiaflatoxinogenic Effects of Cymbopogon</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30225;left:128"><nobr>citratus, Cymbopogon nardus, and Cymbopogon schoenanthus Essential Oils</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30246;left:128"><nobr>Alone and in Combination. <b>Journal of Fungi</b>, v. 8, n. 2, p. 117, 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30287;left:128"><nobr>SHARMA, S. et al. Chemical properties and therapeutic potential of citral, a</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30308;left:128"><nobr>monoterpene isolated from lemongrass. <b>Medicinal Chemistry</b>, v. 17, n. 1, p. 2-</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30328;left:128"><nobr>12, 2021. </nobr></div> </span></font> <div style="position:absolute;top:30463;left:0"><hr><table border=0 width=100%><tr><td bgcolor=eeeeee align=right><font face=arial,sans-serif><a name=25><b>Page 25</b></a></font></td></tr></table></div><font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:14px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:31679;left:790"><nobr>26</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#ffffff" face="Times"><span style="font-size:12px;font-family:Times;color:#ffffff"> <div style="position:absolute;top:31681;left:141"><nobr>CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO, Portugal, v.16, n.2 p. 01-25, 2024</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:30658;left:128"><nobr>SHEN, N. <i>et al. </i>Plant flavonoids: Classification, distribution, biosynthesis, and</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30679;left:128"><nobr>antioxidant activity. <b>Food Chemistry</b>, v. 383, p. 132531, 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30720;left:128"><nobr>SILVA, M. A. L. DA <i>et al. </i>Evaluation of the chemical composition of Cymbopogon</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30741;left:128"><nobr>citratus Stapf growing in environments with different pollution levels and the</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30762;left:128"><nobr>influence on tea composition. <b>Acta Scientiarum - Health Sciences</b>, v. 32, n. 1,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30783;left:128"><nobr>p. 67–72, 2010.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30824;left:128"><nobr>SOARES, A. T. <i>et al. </i>Ultrastructure evaluation of goat spermatozoa after freezing</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30845;left:128"><nobr>in a skim milk-based extender with Trolox supplementation. <b>Andrologia</b>, v. 47,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30865;left:128"><nobr>n. 4, p. 470–476, 2015.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30907;left:128"><nobr>TARDIF, S. <i>et al. </i>The importance of porcine sperm parameters on fertility in vivo.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30928;left:128"><nobr><b>Theriogenology</b>, v. 52, n. 3, p. 447–459, 1999.</nobr></div> </span></font> <font size=3 color="#212121" face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times;color:#212121"> <div style="position:absolute;top:30969;left:128"><nobr>TEIXEIRA, J.; HESPANHOL, A. N. A trajetória da pecuária bovina brasileira.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:30990;left:128"><nobr><b>Caderno Prudentino de Geografia</b>, v. 2, n. 36, p. 26-38, 2014.</nobr></div> </span></font> <font size=3 face="Times"><span style="font-size:16px;font-family:Times"> <div style="position:absolute;top:31031;left:128"><nobr>TERTO E SOUSA, G. G. <i>et al</i>. Eficiência reprodutiva em bovinos de leite através</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31052;left:128"><nobr>da monta natural e inseminação artificial. <b>Acta Tecnológica</b>, [S. l.], v. 8, n. 2, p.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31072;left:128"><nobr>12–18, 2014. DOI: 10.35818/acta.v8i2.166.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31114;left:128"><nobr>WANG, H. <i>et al. </i>Oligomeric Proanthocyanidins and Bamboo Leaf Flavonoids</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31135;left:128"><nobr>Improve the Quality of Bull Semen Cryopreservation. <b>Molecules</b>, v. 27, n. 3, p.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31155;left:128"><nobr>1144, 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31197;left:128"><nobr>WANG, Z.-L. <i>et al. </i>A comprehensive review on phytochemistry, pharmacology,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31217;left:128"><nobr>and flavonoid biosynthesis of <i>Scutellaria baicalensis</i>. <b>Pharmaceutical Biology</b>,</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31238;left:128"><nobr>v. 56, n. 1, p. 465–484, 2018.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31279;left:128"><nobr>WHALEY, D. <i>et al</i>. Cryopreservation: an overview of principles and cell-specific</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31300;left:128"><nobr>considerations. <b>Cell Transplantation</b>, v. 30, p. 0963689721999617, 2021.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31342;left:128"><nobr>YUAN, C. <i>et al. </i>Combined Effect of Flaxseed Oil and Vitamin E Supplementation</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31362;left:128"><nobr>During Bull Semen Cryopreservation on Sperm Characteristics. <b>Biopreservation</b></nobr></div> <div style="position:absolute;top:31383;left:128"><nobr><b>and Biobanking</b>, v. 20, n. 6, p. 520–528, 2022.</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31424;left:128"><nobr>ZHANG, L. <i>et al</i>. Effects of Different Diluents on Semen Quality of Hu Ram Stored</nobr></div> <div style="position:absolute;top:31445;left:128"><nobr>at 4° C. <b>Animals</b>, v. 13, n. 18, p. 2823, 2023. </nobr></div> </span></font> </body> </html>