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光学顕微鏡 - Wikipedia

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class="vector-toc-list-item vector-toc-level-1"> <a href="#" class="vector-toc-link"> <div class="vector-toc-text">ページ先頭</div> </a> </li> <li id="toc-概要" class="vector-toc-list-item vector-toc-level-1 vector-toc-list-item-expanded"> <a class="vector-toc-link" href="#概要"> <div class="vector-toc-text"> <span class="vector-toc-numb">1</span> <span>概要</span> </div> </a> <ul id="toc-概要-sublist" class="vector-toc-list"> </ul> </li> <li id="toc-基本構成" class="vector-toc-list-item vector-toc-level-1 vector-toc-list-item-expanded"> <a class="vector-toc-link" href="#基本構成"> <div class="vector-toc-text"> <span class="vector-toc-numb">2</span> <span>基本構成</span> </div> </a> <ul id="toc-基本構成-sublist" class="vector-toc-list"> </ul> </li> <li id="toc-可視光線の利点と制約" class="vector-toc-list-item vector-toc-level-1 vector-toc-list-item-expanded"> <a class="vector-toc-link" href="#可視光線の利点と制約"> <div class="vector-toc-text"> <span class="vector-toc-numb">3</span> <span>可視光線の利点と制約</span> </div> </a> <ul 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class="vector-toc-text"> <span class="vector-toc-numb">7</span> <span>関連項目</span> </div> </a> <ul id="toc-関連項目-sublist" class="vector-toc-list"> </ul> </li> <li id="toc-外部リンク" class="vector-toc-list-item vector-toc-level-1 vector-toc-list-item-expanded"> <a class="vector-toc-link" href="#外部リンク"> <div class="vector-toc-text"> <span class="vector-toc-numb">8</span> <span>外部リンク</span> </div> </a> <ul id="toc-外部リンク-sublist" class="vector-toc-list"> </ul> </li> </ul> </div> </div> </nav> </div> </div> <div class="mw-content-container"> <main id="content" class="mw-body"> <header class="mw-body-header vector-page-titlebar"> <nav aria-label="目次" class="vector-toc-landmark"> <div id="vector-page-titlebar-toc" class="vector-dropdown vector-page-titlebar-toc vector-button-flush-left" > <input type="checkbox" id="vector-page-titlebar-toc-checkbox" role="button" aria-haspopup="true" data-event-name="ui.dropdown-vector-page-titlebar-toc" class="vector-dropdown-checkbox " aria-label="目次の表示・非表示を切り替え" 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title="アストゥリアス語: Microscopiu ópticu" lang="ast" hreflang="ast" data-title="Microscopiu ópticu" data-language-autonym="Asturianu" data-language-local-name="アストゥリアス語" class="interlanguage-link-target"><span>Asturianu</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-az mw-list-item"><a href="https://az.wikipedia.org/wiki/Optik_mikroskop" title="アゼルバイジャン語: Optik mikroskop" lang="az" hreflang="az" data-title="Optik mikroskop" data-language-autonym="Azərbaycanca" data-language-local-name="アゼルバイジャン語" class="interlanguage-link-target"><span>Azərbaycanca</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-bn mw-list-item"><a href="https://bn.wikipedia.org/wiki/%E0%A6%86%E0%A6%B2%E0%A7%8B%E0%A6%95_%E0%A6%85%E0%A6%A3%E0%A7%81%E0%A6%AC%E0%A7%80%E0%A6%95%E0%A7%8D%E0%A6%B7%E0%A6%A3_%E0%A6%AF%E0%A6%A8%E0%A7%8D%E0%A6%A4%E0%A7%8D%E0%A6%B0" title="ベンガル語: আলোক অণুবীক্ষণ যন্ত্র" lang="bn" hreflang="bn" data-title="আলোক অণুবীক্ষণ যন্ত্র" data-language-autonym="বাংলা" 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մանրադիտակ" lang="hy" hreflang="hy" data-title="Լուսային մանրադիտակ" data-language-autonym="Հայերեն" data-language-local-name="アルメニア語" class="interlanguage-link-target"><span>Հայերեն</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-id mw-list-item"><a href="https://id.wikipedia.org/wiki/Mikroskop_cahaya" title="インドネシア語: Mikroskop cahaya" lang="id" hreflang="id" data-title="Mikroskop cahaya" data-language-autonym="Bahasa Indonesia" data-language-local-name="インドネシア語" class="interlanguage-link-target"><span>Bahasa Indonesia</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-it mw-list-item"><a href="https://it.wikipedia.org/wiki/Microscopio_ottico" title="イタリア語: Microscopio ottico" lang="it" hreflang="it" data-title="Microscopio ottico" data-language-autonym="Italiano" data-language-local-name="イタリア語" class="interlanguage-link-target"><span>Italiano</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-ko mw-list-item"><a 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Melayu</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-nn mw-list-item"><a href="https://nn.wikipedia.org/wiki/Lysmikroskop" title="ノルウェー語(ニーノシュク): Lysmikroskop" lang="nn" hreflang="nn" data-title="Lysmikroskop" data-language-autonym="Norsk nynorsk" data-language-local-name="ノルウェー語(ニーノシュク)" class="interlanguage-link-target"><span>Norsk nynorsk</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-pa mw-list-item"><a href="https://pa.wikipedia.org/wiki/%E0%A8%96%E0%A8%BC%E0%A9%81%E0%A8%B0%E0%A8%A6%E0%A8%AC%E0%A9%80%E0%A8%A8" title="パンジャブ語: ਖ਼ੁਰਦਬੀਨ" lang="pa" hreflang="pa" data-title="ਖ਼ੁਰਦਬੀਨ" data-language-autonym="ਪੰਜਾਬੀ" data-language-local-name="パンジャブ語" class="interlanguage-link-target"><span>ਪੰਜਾਬੀ</span></a></li><li class="interlanguage-link interwiki-pl mw-list-item"><a href="https://pl.wikipedia.org/wiki/Mikroskop_optyczny" title="ポーランド語: Mikroskop optyczny" lang="pl" hreflang="pl" data-title="Mikroskop optyczny" data-language-autonym="Polski" 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wb-otherproject-commons mw-list-item"><a href="https://commons.wikimedia.org/wiki/Category:Light_microscopes" hreflang="en"><span>コモンズ</span></a></li><li class="wb-otherproject-link wb-otherproject-wikibooks mw-list-item"><a href="https://ja.wikibooks.org/wiki/%E7%99%BA%E5%B1%95%E8%AC%9B%E7%BE%A9%E9%AB%98%E6%A0%A1%E7%94%9F%E7%89%A9/%E3%81%84%E3%82%8D%E3%81%84%E3%82%8D%E3%81%AA%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%E5%83%8F" hreflang="ja"><span>ウィキブックス</span></a></li><li id="t-wikibase" class="wb-otherproject-link wb-otherproject-wikibase-dataitem mw-list-item"><a href="https://www.wikidata.org/wiki/Special:EntityPage/Q912313" title="関連付けられたデータリポジトリ項目へのリンク [g]" accesskey="g"><span>ウィキデータ項目</span></a></li> </ul> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </nav> </div> </div> </div> <div class="vector-column-end"> <div class="vector-sticky-pinned-container"> <nav class="vector-page-tools-landmark" aria-label="ページツール"> <div id="vector-page-tools-pinned-container" class="vector-pinned-container"> 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aria-labelledby="firstHeading" data-mw-ve-target-container> <div class="vector-body-before-content"> <div class="mw-indicators"> </div> <div id="siteSub" class="noprint">出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』</div> </div> <div id="contentSub"><div id="mw-content-subtitle"></div></div> <div id="mw-content-text" class="mw-body-content"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="ja" dir="ltr"><style data-mw-deduplicate="TemplateStyles:r101304250">.mw-parser-output .ambox{border:1px solid #a2a9b1;border-left:10px solid #36c;background-color:#fbfbfb;box-sizing:border-box}.mw-parser-output .ambox+link+.ambox,.mw-parser-output .ambox+link+style+.ambox,.mw-parser-output .ambox+link+link+.ambox,.mw-parser-output .ambox+.mw-empty-elt+link+.ambox,.mw-parser-output .ambox+.mw-empty-elt+link+style+.ambox,.mw-parser-output .ambox+.mw-empty-elt+link+link+.ambox{margin-top:-1px}html body.mediawiki .mw-parser-output .ambox.mbox-small-left{margin:4px 1em 4px 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.mbox-text-span{margin-left:23px!important}@media(min-width:720px){.mw-parser-output .ambox{margin:0 10%}}@media print{body.ns-0 .mw-parser-output .ambox{display:none!important}}</style><table class="box-出典の明記 plainlinks metadata ambox ambox-content ambox-出典の明記" role="presentation"><tbody><tr><td class="mbox-image"><div class="mbox-image-div"><span typeof="mw:File"><span><img src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/64/Question_book-4.svg/50px-Question_book-4.svg.png" decoding="async" width="50" height="39" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/64/Question_book-4.svg/75px-Question_book-4.svg.png 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/64/Question_book-4.svg/100px-Question_book-4.svg.png 2x" data-file-width="262" data-file-height="204" /></span></span></div></td><td class="mbox-text"><div class="mbox-text-span"><b>この記事は<a href="/wiki/Wikipedia:%E6%A4%9C%E8%A8%BC%E5%8F%AF%E8%83%BD%E6%80%A7" title="Wikipedia:検証可能性">検証可能</a>な<a href="/wiki/Wikipedia:%E4%BF%A1%E9%A0%BC%E3%81%A7%E3%81%8D%E3%82%8B%E6%83%85%E5%A0%B1%E6%BA%90" title="Wikipedia:信頼できる情報源">参考文献や出典</a>が全く示されていないか、不十分です。</b><span class="hide-when-compact"> <a href="/wiki/Wikipedia:%E5%87%BA%E5%85%B8%E3%82%92%E6%98%8E%E8%A8%98%E3%81%99%E3%82%8B" title="Wikipedia:出典を明記する">出典を追加</a>して記事の信頼性向上にご協力ください。<small>(<a href="/wiki/Template:%E5%87%BA%E5%85%B8%E3%81%AE%E6%98%8E%E8%A8%98/doc" title="Template:出典の明記/doc">このテンプレートの使い方</a>)</small><br /><small><span class="plainlinks">出典検索<a href="/wiki/Template:Find_sources_mainspace" title="Template:Find sources mainspace"><sup>?</sup></a>:&#160;<a rel="nofollow" class="external text" href="//www.google.co.jp/search?hl=ja&amp;as_eq=wikipedia&amp;q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22&amp;num=50">"光学顕微鏡"</a>&#160;–&#160;<a rel="nofollow" class="external text" href="//www.google.co.jp/search?hl=ja&amp;q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22&amp;tbm=nws">ニュース</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.google.co.jp/search?hl=ja&amp;tbs=bks:1&amp;q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">書籍</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="//scholar.google.co.jp/scholar?num=100&amp;hl=ja&amp;q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">スカラー</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://ci.nii.ac.jp/opensearch/search?lang=ja&amp;q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22&amp;range=2&amp;count=200&amp;sortorder=1&amp;type=0">CiNii</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://www.jstage.jst.go.jp/result/global/-char/ja?globalSearchKey=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">J-STAGE</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://ndlsearch.ndl.go.jp/api/openurl?any=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">NDL</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://dlib.jp/?q=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">dlib.jp</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://jpsearch.go.jp/csearch/jps-cross?csid=jps-cross&amp;keyword=%22%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1%22">ジャパンサーチ</a>&#160;<b>·</b> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://wikipedialibrary.wmflabs.org/partners/">TWL</a></span></small></span> <span class="date-container"><i>(<span class="date"><span title="2010年3月">2010年3月</span></span>)</i></span></div></td></tr></tbody></table> <figure class="mw-halign-right" typeof="mw:File/Thumb"><a href="/wiki/%E3%83%95%E3%82%A1%E3%82%A4%E3%83%AB:Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg" class="mw-file-description"><img src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/3a/Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg/200px-Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg" decoding="async" width="200" height="303" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/3a/Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg/300px-Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/3a/Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg/400px-Optical_microscope_nikon_alphaphot.jpg 2x" data-file-width="1200" data-file-height="1817" /></a><figcaption><b>研究・実習用光学顕微鏡の例</b> 1:<a href="/wiki/%E6%8E%A5%E7%9C%BC%E3%83%AC%E3%83%B3%E3%82%BA" title="接眼レンズ">接眼レンズ</a>、2:レボルバ、3:<a href="/wiki/%E5%AF%BE%E7%89%A9%E3%83%AC%E3%83%B3%E3%82%BA" title="対物レンズ">対物レンズ</a>、4:粗動ハンドル、5:微動ハンドル、6:ステージ、7:鏡、8:コンデンサ、9:プレパラート微動装置</figcaption></figure> <figure class="mw-halign-right" typeof="mw:File/Thumb"><a href="/wiki/%E3%83%95%E3%82%A1%E3%82%A4%E3%83%AB:Mikroskop.png" class="mw-file-description"><img src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/9/95/Mikroskop.png/200px-Mikroskop.png" decoding="async" width="200" height="305" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/9/95/Mikroskop.png 1.5x" data-file-width="221" data-file-height="337" /></a><figcaption><b>1900年代初頭に用いられていた顕微鏡の模式図</b> 1:接眼レンズ、2:レボルバ、3:対物レンズ、4:粗動ハンドル、5:微動ハンドル、6:ステージ、7:鏡、8:絞り</figcaption></figure> <figure class="mw-halign-right" typeof="mw:File/Thumb"><a href="/wiki/%E3%83%95%E3%82%A1%E3%82%A4%E3%83%AB:Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg" class="mw-file-description"><img src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/21/Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg/200px-Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg" decoding="async" width="200" height="301" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/21/Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg/300px-Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/21/Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg/400px-Optical_stereo_microscope_nikon_smz10.jpg 2x" data-file-width="1478" data-file-height="2224" /></a><figcaption>双眼実体顕微鏡<br />(ズーム機構・写真撮影対応鏡筒つき)</figcaption></figure> <figure class="mw-default-size mw-halign-right" typeof="mw:File/Thumb"><a href="/wiki/%E3%83%95%E3%82%A1%E3%82%A4%E3%83%AB:Sztereomik.png" class="mw-file-description"><img src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/b/ba/Sztereomik.png/220px-Sztereomik.png" decoding="async" width="220" height="167" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/b/ba/Sztereomik.png/330px-Sztereomik.png 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/b/ba/Sztereomik.png/440px-Sztereomik.png 2x" data-file-width="727" data-file-height="551" /></a><figcaption><b>双眼顕微鏡の光学系</b><br />A:対物レンズ、B:ガリレオ望遠鏡<sup id="cite_ref-1" class="reference"><a href="#cite_note-1"><span class="cite-bracket">&#91;</span>1<span class="cite-bracket">&#93;</span></a></sup>、C:調整ハンドル、D:内部対物レンズ、E:プリズム、F:リレーレンズ、G:網線、H:接眼レンズ</figcaption></figure> <p><b>光学顕微鏡</b>(こうがくけんびきょう)は、<a href="/wiki/%E5%8F%AF%E8%A6%96%E5%85%89%E7%B7%9A" title="可視光線">可視光線</a>および近傍の波長域の光を利用する、<a href="/wiki/%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="顕微鏡">顕微鏡</a>の一種。単に顕微鏡と言う場合、これを指す。 </p> <meta property="mw:PageProp/toc" /> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="概要"><span id=".E6.A6.82.E8.A6.81"></span>概要</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=1" title="節を編集: 概要"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <p>光学顕微鏡は、ふつう試料に<a href="/wiki/%E5%85%89" title="光">光</a>を照射して、<a href="/wiki/%E9%80%8F%E9%81%8E%E5%85%89" class="mw-redirect" title="透過光">透過光</a>や<a href="/w/index.php?title=%E5%8F%8D%E5%B0%84%E5%85%89&amp;action=edit&amp;redlink=1" class="new" title="「反射光」 (存在しないページ)">反射光</a>あるいは<a href="/wiki/%E8%9B%8D%E5%85%89" title="蛍光">蛍光</a>など試料が発する光を<a href="/wiki/%E3%83%AC%E3%83%B3%E3%82%BA" title="レンズ">レンズ</a>によって結像させて観察する。観察可能な倍率は一般に数十倍から数百倍、最高で2千倍程度。 </p><p>顕微鏡技術のことを<b>顕微鏡法</b>(<a href="https://en.wikipedia.org/wiki/microscopy" class="extiw" title="en:microscopy">microscopy</a>)、<b>検鏡法</b>という。また、試料を顕微鏡で観察できる状態にしたものを<a href="/wiki/%E3%83%97%E3%83%AC%E3%83%91%E3%83%A9%E3%83%BC%E3%83%88" title="プレパラート">プレパラート</a>と呼び、通常は<a href="/wiki/%E3%82%B9%E3%83%A9%E3%82%A4%E3%83%89%E3%82%AC%E3%83%A9%E3%82%B9" title="スライドガラス">スライドガラス</a>に貼り付けた試料を適当な<a href="/wiki/%E5%B1%88%E6%8A%98%E7%8E%87" title="屈折率">屈折率</a>の封入剤とともに<a href="/wiki/%E3%82%AB%E3%83%90%E3%83%BC%E3%82%AC%E3%83%A9%E3%82%B9" class="mw-redirect" title="カバーガラス">カバーガラス</a>の下に封じたものを用いる。 </p><p>顕微鏡の中では最初に開発されたものであり、単一のレンズによる観察法の拡張として開発された。1群のレンズのみで構成された顕微鏡を<b>単式顕微鏡</b>(Simple optical microscope)、2群以上のレンズで構成された顕微鏡を<b>複式顕微鏡</b>(Compound optical microscope)と呼ぶ。前者ではオランダの<a href="/wiki/%E3%83%AC%E3%83%BC%E3%82%A6%E3%82%A7%E3%83%B3%E3%83%95%E3%83%83%E3%82%AF" class="mw-redirect" title="レーウェンフック">レーウェンフック</a>が自作の顕微鏡で様々な生物学的発見をしたことで知られる。以下では主として後者の<b>複式顕微鏡</b>について述べる。 </p> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="基本構成"><span id=".E5.9F.BA.E6.9C.AC.E6.A7.8B.E6.88.90"></span>基本構成</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=2" title="節を編集: 基本構成"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <dl><dt>鏡台・鏡柱(ベース・アーム) (Base, Arm or Pillar)</dt> <dd>顕微鏡の骨格であり、各要素を正確な位置に支える。</dd> <dt>照明装置 (Light Source)</dt> <dd>観察のための光を供給する。ランプや反射鏡、コンデンサなど。</dd> <dt>ステージ (Stage)</dt> <dd>プレパラートを固定する。</dd> <dt>対物レンズ (Object Lenses)</dt> <dd>プレパラートに面するレンズで、中間実像を結ぶ。</dd> <dt>レボルバ (Rotating Nose Piece)</dt> <dd>対物レンズを複数取り付けてあり、これを回転させることで使用する対物レンズを切り替えることができる。</dd> <dt>鏡筒 (Iris Diaphragm)</dt> <dd>対物レンズと接眼レンズとの正確な位置決めを行い光路を確保する。</dd> <dt>接眼レンズ (Binocular or Ocular Lens)</dt> <dd>対物レンズが結んだ中間実像を拡大し観察できるようにする。</dd> <dt>焦準装置 (Light Dimmer)</dt> <dd>プレパラートと対物レンズとの距離を変化させピントを合わせる。</dd></dl> <p>顕微鏡の光学系は17世紀に発明されて以来長らく経験と試行錯誤に基づき設計制作されてきたが、19世紀後半に至り<a href="/wiki/%E3%82%AB%E3%83%BC%E3%83%AB%E3%83%BB%E3%83%84%E3%82%A1%E3%82%A4%E3%82%B9" title="カール・ツァイス">カール・ツァイス</a>社の<a href="/wiki/%E3%82%A8%E3%83%AB%E3%83%B3%E3%82%B9%E3%83%88%E3%83%BB%E3%82%A2%E3%83%83%E3%83%99" title="エルンスト・アッベ">エルンスト・アッベ</a>によって理論的基礎が確立された。当時カール・ツァイス社で製作された顕微鏡のスタイルはひとつの標準となり、世界中のメーカーがそれに倣った顕微鏡を製作したほか、その基本的なデザインは21世紀に至っても学習用顕微鏡などに受け継がれている。 </p><p>俗にカール・ツァイス型とも呼ばれる同社で20世紀初頭に製作していたタイプの顕微鏡では、対物レンズと接眼レンズが鏡筒の上下に一直線に配置されている。観察しやすくするために光学系全体を傾けられるようになっているが、試料を液体で封じた一時プレパラートなどでは傾けることができない場合もある。 </p><p>現在ではプリズムを用いて光路を屈曲させ、対物レンズは垂直(プレパラートは水平)を保ちつつ接眼レンズは斜めとして観察しやすくしたものが一般的。観察者のさらなる負担軽減のため、対物レンズから入った光をプリズムで分割して左右の接眼レンズに振り分けるタイプが多い。このような顕微鏡は<b>双眼顕微鏡</b>(binocular microscope)と呼ばれることもあるが、業務用途ではむしろ単眼の方が特殊である。撮影装置用の鏡筒をもつ三眼式のものもあり、撮影時には光路を撮影装置側に切り替える。 </p><p>焦準装置(ピント合わせ機構)は、かつては鏡柱とそこに固定されたステージに対して鏡筒を上下させる構造であったが、<a href="/wiki/%E5%B1%88%E6%9B%B2%E5%85%89%E5%AD%A6%E7%B3%BB" title="屈曲光学系">屈曲光学系</a>の採用に伴い、鏡筒の方を鏡柱と一体化してステージおよびコンデンサを上下させる構造が一般化した。この構造は光学的付加部品や撮影装置などの取り付けに有利である。 </p><p>上記の基本構成は<b>有限遠補正光学系</b>と呼ばれ、対物レンズと接眼レンズとの距離が固定されるなど設計の自由度が低く、また光路上に落射照明(後述)のための<a href="/wiki/%E3%83%93%E3%83%BC%E3%83%A0%E3%82%B9%E3%83%97%E3%83%AA%E3%83%83%E3%82%BF%E3%83%BC" title="ビームスプリッター">ハーフミラー</a>などを挿入すると像に悪影響が出た。これに対し1990年代から普及してきた<b>無限遠補正光学系</b>においては、対物レンズは中間像を結ばず平行光線を射出し、鏡筒内の結像レンズ(チューブレンズ)で中間像を結ぶ。平行光線となっている部分の長さは自由に変更でき、またハーフミラーなどを挿入してもゴーストや<a href="/wiki/%E5%8F%8E%E5%B7%AE" title="収差">収差</a>が発生することがない。なお、有限系と無限系の対物レンズはその機能が全く異なるため、互換性はない。 </p><p>近年は光学顕微鏡の接眼部に<a href="/wiki/CCD%E3%82%A4%E3%83%A1%E3%83%BC%E3%82%B8%E3%82%BB%E3%83%B3%E3%82%B5" title="CCDイメージセンサ">CCDイメージセンサ</a>と<a href="/wiki/%E6%B6%B2%E6%99%B6%E3%83%87%E3%82%A3%E3%82%B9%E3%83%97%E3%83%AC%E3%82%A4" title="液晶ディスプレイ">液晶ディスプレイ</a>を設置し、多人数での同時観察やデジタル撮影・録画を可能にした物があり、しばしば「電子顕微鏡」と称している場合があるが、本来の<a href="/wiki/%E9%9B%BB%E5%AD%90%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="電子顕微鏡">電子顕微鏡</a>とは全くの別物である。 </p> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="可視光線の利点と制約"><span id=".E5.8F.AF.E8.A6.96.E5.85.89.E7.B7.9A.E3.81.AE.E5.88.A9.E7.82.B9.E3.81.A8.E5.88.B6.E7.B4.84"></span>可視光線の利点と制約</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=3" title="節を編集: 可視光線の利点と制約"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <p>光学顕微鏡は、観察したい物体の<a href="/wiki/%E5%85%89" title="光">光</a>の透過率など、物体が光に及ぼすさまざまな効果を利用するものである。可視光線を使う利点は、他の<a href="/wiki/%E9%9B%BB%E7%A3%81%E6%B3%A2" title="電磁波">電磁波</a>よりも簡素な光源を用いる事ができる点、そして元々可視的である為に、観察者の眼に届く前に可視光へ変換する必要が無く、色の情報が直接得られる点である。 </p><p>しかし一方で、光学顕微鏡の性能は光の物理的性質の制約を受ける。例えば、光学顕微鏡における<a href="/wiki/%E5%88%86%E8%A7%A3%E8%83%BD" title="分解能">分解能</a>の限界は可視光線の波長に因る部分が大きい。このような制約から逃れる為に、より短波長域の<a href="/wiki/X%E7%B7%9A" title="X線">X線</a>の透過や反射を利用したX線顕微鏡や、<a href="/wiki/%E9%9B%BB%E5%AD%90%E7%B7%9A" class="mw-redirect" title="電子線">電子線</a>の加速電圧によって分解能が制御できる<a href="/wiki/%E9%9B%BB%E5%AD%90%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="電子顕微鏡">電子顕微鏡</a>が開発された。また、<a href="/wiki/%E3%83%88%E3%83%B3%E3%83%8D%E3%83%AB%E5%8A%B9%E6%9E%9C" title="トンネル効果">トンネル効果</a>を用いたトンネル顕微鏡や原子間力を用いた<a href="/wiki/%E5%8E%9F%E5%AD%90%E9%96%93%E5%8A%9B%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="原子間力顕微鏡">原子間力顕微鏡</a>など、<a href="/wiki/%E8%A1%A8%E9%9D%A2%E7%89%A9%E7%90%86%E5%AD%A6" class="mw-redirect" title="表面物理学">表面物理学</a>を応用した顕微鏡も実用化されている。 </p> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="光学顕微鏡の種類"><span id=".E5.85.89.E5.AD.A6.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1.E3.81.AE.E7.A8.AE.E9.A1.9E"></span>光学顕微鏡の種類</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=4" title="節を編集: 光学顕微鏡の種類"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="(普通の)顕微鏡"><span id=".EF.BC.88.E6.99.AE.E9.80.9A.E3.81.AE.EF.BC.89.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>(普通の)顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=5" title="節を編集: (普通の)顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <dl><dt>金属顕微鏡</dt> <dd>金属表面の観察に適した顕微鏡の意で、対物レンズ側から光を試料にあてて反射光で観察する落射照明型顕微鏡のこと。</dd> <dt>生物顕微鏡</dt> <dd>主に医学・生物学の分野で用いられる顕微鏡の意で、透過観察型顕微鏡(=明視野顕微鏡)のこと。</dd> <dt>明視野顕微鏡</dt> <dd>もっとも基本的な光学顕微鏡。試料を均一な入射光で照らした時、試料の各部分において光の吸収率が異なる為に透過光の像に<a href="/wiki/%E3%82%B3%E3%83%B3%E3%83%88%E3%83%A9%E3%82%B9%E3%83%88" title="コントラスト">コントラスト</a>が付くことを利用する。吸収率の小さい試料ではコントラストが低く明瞭な像が得られない為、<a href="/wiki/%E6%9F%93%E8%89%B2_(%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6)" title="染色 (生物学)">染色</a>を施すなどの必要がある。</dd> <dt><a href="/wiki/%E6%9A%97%E8%A6%96%E9%87%8E%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" class="mw-redirect" title="暗視野顕微鏡">暗視野顕微鏡</a></dt> <dd>試料へ斜めから光をあてて生じた<a href="/wiki/%E6%95%A3%E4%B9%B1" title="散乱">散乱</a>光や反射光を観察する。この方法では明視野顕微鏡とは逆に、視野の背景が黒く、試料が光って見える。通常の光学顕微鏡に暗視野コンデンサーを挿入するだけでこの方法が実現できる。または位相差顕微鏡を調節することでも暗視野法による観察が可能である。物体表面や内部の微細な構造の観察には不向きであるが、可視光の波長よりも小さな物体の存在を高いコントラストで観察することが可能である。</dd> <dt>双眼<a href="/wiki/%E5%AE%9F%E4%BD%93%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="実体顕微鏡">実体顕微鏡</a></dt> <dd>正立視野が得られる光学系を2組備えた、比較的大きな試料を立体的に観察するタイプの顕微鏡。観察倍率は通常数倍〜数十倍と比較的低い。大型試料の観察や顕微鏡下での作業を考慮し試料と対物レンズとの距離(ワーキングディスタンス)が確保されている(対物レンズの焦点距離が大きい)のも特徴である。製品検査などに利用されることも多い。</dd> <dt>倒立顕微鏡</dt> <dd>対物レンズが観察対象物の下側に位置する顕微鏡。培養細胞を培養容器ごと観察したり、マイクロマニピュレーションを行ったりするのに利用される。</dd> <dt>測定顕微鏡</dt> <dd>試料の計測を目的とした顕微鏡。ステージに測定機や測定目盛を持ち、視野にも<a href="/wiki/%E3%83%9F%E3%82%AF%E3%83%AD%E3%83%A1%E3%83%BC%E3%82%BF%E3%83%BC" title="ミクロメーター">ミクロメーター</a>やテンプレートが表示される。観察倍率の正確性と共に像の歪みを最小限に抑える事が要求される顕微鏡で、主光線がレンズ光軸に対して平行となる<a href="/wiki/%E3%83%86%E3%83%AC%E3%82%BB%E3%83%B3%E3%83%88%E3%83%AA%E3%83%83%E3%82%AF%E5%85%89%E5%AD%A6%E7%B3%BB" title="テレセントリック光学系">テレセントリック光学系</a>を採用する例が多い。</dd> <dt>解剖顕微鏡</dt> <dd>顕微鏡と呼ばれてはいるが、倍率は数倍程度で、ステージに<a href="/wiki/%E3%83%AC%E3%83%B3%E3%82%BA#ルーペ" title="レンズ">虫眼鏡</a>を固定したような形態である。</dd></dl> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="位相差顕微鏡"><span id=".E4.BD.8D.E7.9B.B8.E5.B7.AE.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>位相差顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=6" title="節を編集: 位相差顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E4%BD%8D%E7%9B%B8%E5%B7%AE%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="位相差顕微鏡">位相差顕微鏡</a>」を参照</div> <p>無色透明ではあるが屈折率が異なる部分からなる試料を観察する為の顕微鏡。屈折率が大きな媒質中を通る光は、屈折率が小さい媒質中を通る光よりもその<a href="/wiki/%E4%BD%8D%E7%9B%B8" title="位相">位相</a>が遅れる。この位相差に関わる<a href="/wiki/%E5%9B%9E%E6%8A%98" title="回折">回折</a>光を利用する顕微鏡である。コンデンサーと対物レンズにより位相のずれた回折光同士を<a href="/wiki/%E5%B9%B2%E6%B8%89_(%E7%89%A9%E7%90%86%E5%AD%A6)" title="干渉 (物理学)">干渉</a>させ、位相差を明暗に変えて観察する。この方法により、ほとんど透明な生物細胞の内部構造を観察することが可能である。位相差コンデンサーと位相差用対物レンズを利用する。1934年<sup class="noprint Template-Fact">&#91;<i><a href="/wiki/Wikipedia:%E3%80%8C%E8%A6%81%E5%87%BA%E5%85%B8%E3%80%8D%E3%82%92%E3%82%AF%E3%83%AA%E3%83%83%E3%82%AF%E3%81%95%E3%82%8C%E3%81%9F%E6%96%B9%E3%81%B8" title="Wikipedia:「要出典」をクリックされた方へ"><span title="この記述には信頼できる情報源の提示が求められています。(2008年5月)">要出典</span></a></i>&#93;</sup>オランダの<a href="/wiki/%E3%83%95%E3%83%AA%E3%83%83%E3%83%84%E3%83%BB%E3%82%BC%E3%83%AB%E3%83%8B%E3%82%B1" title="フリッツ・ゼルニケ">ゼルニケ</a> (Frits (Frederik) Zernike)が考案。1953年<a href="/wiki/%E3%83%8E%E3%83%BC%E3%83%99%E3%83%AB%E7%89%A9%E7%90%86%E5%AD%A6%E8%B3%9E" title="ノーベル物理学賞">ノーベル物理学賞</a>受賞。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="微分干渉顕微鏡"><span id=".E5.BE.AE.E5.88.86.E5.B9.B2.E6.B8.89.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>微分干渉顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=7" title="節を編集: 微分干渉顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E5%BE%AE%E5%88%86%E5%B9%B2%E6%B8%89%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="微分干渉顕微鏡">微分干渉顕微鏡</a>」を参照</div> <p>光の<a href="/wiki/%E5%81%8F%E5%85%89" title="偏光">偏光</a>性と<a href="/wiki/%E5%B9%B2%E6%B8%89_(%E7%89%A9%E7%90%86%E5%AD%A6)" title="干渉 (物理学)">干渉</a>性を利用して、無色透明な<a href="/wiki/%E7%B4%B0%E8%83%9E" title="細胞">細胞</a>や金属表面の段差などを観察する顕微鏡。偏光素子とウォラストンプリズム(ノマルスキープリズム)によって光線を分離して試料面を通過させ、試料で生じる光路差の微分値を像面でコントラストに変える。試料面での光線の分離量をシアー量といい、<a href="/wiki/%E5%88%86%E8%A7%A3%E8%83%BD" title="分解能">分解能</a>やコントラストに影響する。現在の顕微鏡では、スミス・ノマルスキー型という構成が多い。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="偏光顕微鏡"><span id=".E5.81.8F.E5.85.89.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>偏光顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=8" title="節を編集: 偏光顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E5%81%8F%E5%85%89%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="偏光顕微鏡">偏光顕微鏡</a>」を参照</div> <p>物体は内部構造や結晶構造によって、光の振動方向を変える<a href="/w/index.php?title=%E5%81%8F%E5%85%89%E6%80%A7&amp;action=edit&amp;redlink=1" class="new" title="「偏光性」 (存在しないページ)">偏光性</a>を有する。この偏光性を観察する方法である。光学顕微鏡のコンデンサーの場所にポラライザー(偏光板)を置き、対物レンズの後ろに遅延版とアナライザー(偏光板)を置き、試料の偏光性や複屈折性を明暗や色の違いとして観察する。偏光板の回転に応じて、結晶などは鮮やかな色で観察される。<a href="/wiki/%E5%B2%A9%E7%9F%B3" title="岩石">岩石</a>などの<a href="/wiki/%E7%B5%90%E6%99%B6" title="結晶">結晶</a>や、生物試料に含まれる結晶質の物質(<a href="/wiki/%E7%B4%B0%E8%83%9E%E5%A4%96%E3%83%9E%E3%83%88%E3%83%AA%E3%83%83%E3%82%AF%E3%82%B9" title="細胞外マトリックス">細胞外マトリックス</a>や異常沈着物のそれぞれ一部など)の観察に用いられる。 </p><p>偏光顕微鏡の欠点であるアナライザーの回転の煩わしさと、得られた画像データの解析処理の複雑さを簡便にするシステムとして、近年 LC-Polscope が発明された。これは電子的に制御できる偏光板と画像解析装置を組み合わせたもので、結晶構造の偏光方向(slow axis orientation)と偏光の強さ(retardation)が一度の観察で得られる。無染色、無侵襲で<a href="/wiki/%E7%B4%B0%E8%83%9E%E9%AA%A8%E6%A0%BC" title="細胞骨格">細胞骨格</a>が観察できるため、<a href="/wiki/%E4%BA%BA%E5%B7%A5%E6%8E%88%E7%B2%BE" title="人工授精">人工授精</a>させた家畜の受精卵の選別などに用いられている。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="蛍光顕微鏡"><span id=".E8.9B.8D.E5.85.89.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>蛍光顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=9" title="節を編集: 蛍光顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E8%9B%8D%E5%85%89%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="蛍光顕微鏡">蛍光顕微鏡</a>」を参照</div> <p>蛍光顕微鏡とは、試料から発せられる<a href="/wiki/%E8%9B%8D%E5%85%89" title="蛍光">蛍光</a>を観察する顕微鏡のこと。試料の固有の自発蛍光を観察する場合の他、蛍光色素による染色を行った上で観察する場合、あるいは遺伝子組み換えにより蛍光性タンパク質を発現させる場合などがある。 </p><p>通常の明視野顕微鏡と異なり、蛍光顕微鏡ではある特定の波長の光(励起光)だけを試料に照射する。試料が発する蛍光の波長は励起光のものとは異なるので、フィルタなどで蛍光のみを取り出すことができる。 </p><p>光源としてよく用いられるのは高圧<a href="/w/index.php?title=%E6%B0%B4%E9%8A%80%E3%83%A9%E3%83%B3%E3%83%97&amp;action=edit&amp;redlink=1" class="new" title="「水銀ランプ」 (存在しないページ)">水銀ランプ</a>である。高圧水銀ランプが発する光は、いくつかの特定の波長の光が混ざったものである。これは水銀の放射スペクトルの波長で、254 nm、365 nm(紫外線)、405 nm(青色光)、546 nm(緑色光)などである。この光をフィルタやプリズムによって分割し、目的の波長の光だけを励起光として照射する。 </p><p>光源の光を顕微鏡の鏡筒の途中(接眼レンズと対物レンズの間)から波長フィルタを兼ねたダイクロックミラー(dichroic mirror)で導入し、対物レンズを通して、試料の中の観察部だけに励起光を当て、同じ対物レンズを用いて蛍光を観察する<b>落射式蛍光顕微鏡</b>が一般的である。通常の明視野顕微鏡に蛍光顕微鏡用のオプション機器を取り付けることで蛍光顕微鏡として使える場合が多い。 </p><p>得られる像は、暗い視野の中に蛍光を発する部分が光って見えるものであり、通常は迷光を防ぐため暗室で観察するか装置の一部が暗箱になっている。接眼レンズを通しての肉眼観察に加えて、1990年代以降はCCDカメラを用いた観察装置が一般化してきており、肉眼では観察不可能な微弱な蛍光を、<a href="/wiki/%E5%86%B7%E5%8D%B4CCD" class="mw-redirect" title="冷却CCD">冷却CCD</a>などの高感度CCDカメラを用いて可視化することも行われている。 </p><p>CCDカメラを撮影に利用することのもう1つの利点は、コンピュータを用いた画像処理が容易になったことである。単に「画像のコントラストの強調が簡単になった」といった利点のみではなく、『複数画像を比較計算することにより、焦点面以外からの光を除く』といった処理も可能になった<sup id="cite_ref-2" class="reference"><a href="#cite_note-2"><span class="cite-bracket">&#91;</span>2<span class="cite-bracket">&#93;</span></a></sup>(<a href="https://en.wikipedia.org/wiki/Deconvolution" class="extiw" title="en:Deconvolution">Deconvolution</a>)。このような数学的画像処理により<a href="/wiki/%E5%85%B1%E7%84%A6%E7%82%B9%E3%83%AC%E3%83%BC%E3%82%B6%E3%83%BC%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="共焦点レーザー顕微鏡">共焦点レーザー顕微鏡</a>にせまる空間解像力を得ることも可能になっている。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="共焦点レーザー顕微鏡"><span id=".E5.85.B1.E7.84.A6.E7.82.B9.E3.83.AC.E3.83.BC.E3.82.B6.E3.83.BC.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>共焦点レーザー顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=10" title="節を編集: 共焦点レーザー顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E5%85%B1%E7%84%A6%E7%82%B9%E3%83%AC%E3%83%BC%E3%82%B6%E3%83%BC%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="共焦点レーザー顕微鏡">共焦点レーザー顕微鏡</a>」を参照</div> <p>光源として<a href="/wiki/%E3%82%AC%E3%82%B9%E3%83%AC%E3%83%BC%E3%82%B6%E3%83%BC" class="mw-redirect" title="ガスレーザー">ガスレーザー</a>、<a href="/wiki/%E5%8D%8A%E5%B0%8E%E4%BD%93%E3%83%AC%E3%83%BC%E3%82%B6%E3%83%BC" title="半導体レーザー">半導体レーザー</a>、そして白色光源も光源として用いられる。レーザーを対物レンズから走査し、励起された試料から放出された蛍光(ないしは試料から反射した光)を<a href="/wiki/%E3%83%94%E3%83%B3%E3%83%9B%E3%83%BC%E3%83%AB" class="mw-redirect" title="ピンホール">ピンホール</a>を通した後に検出装置を用いて検出、コンピューター上にて画像を再構成する。ピンホールを用いることによって同一焦点(共焦点)面以外からの蛍光をシャットアウトすることができるので、開口数に依存した厚さの光学切片像を得ることができる。たとえば<a href="/wiki/%E3%82%A2%E3%83%AB%E3%82%B4%E3%83%B3" title="アルゴン">Ar</a>レーザー(波長488nm)で開口数1.33のレンズを用いたときには厚さ約200nmの光学切片を得ることとなり、透過型電子顕微鏡には大きく劣るものの、従来の光学顕微鏡よりも高い空間解像力を容易に得ることができる。透過型電子顕微鏡の場合と比べて、試料作成が簡単であることも相俟って、1990年代以降、生物学分野にて飛躍的に普及した。欠点は価格が高いことである。 </p><p>光学系としては、主に生物用に使用される蛍光用共焦点顕微鏡と、主に工業用に使用される反射型の共焦点顕微鏡の2種類がある。生物用は、細胞や組織の研究に、工業用は材料の表面検査や半導体の検査などに用いられている。 </p><p>走査方式は、試料を固定した状態でレーザーをミラーや回転ディスクにより走査するビーム走査型と、光ビームは固定して試料(スライドガラス)を縦横に走査する試料走査型がある。後者は<a href="/wiki/DNA%E3%83%9E%E3%82%A4%E3%82%AF%E3%83%AD%E3%82%A2%E3%83%AC%E3%82%A4" title="DNAマイクロアレイ">DNAマイクロアレイ</a>の測定などに使用されている。 </p><p>前項に記述のある、コンピューターを使った画像処理による画質・分解能の向上は、共焦点レーザー顕微鏡でも同様に有効であり、光学限界に迫る、あるいはそれを超える空間解像力を得ることも可能になってきている。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="全反射照明蛍光顕微鏡"><span id=".E5.85.A8.E5.8F.8D.E5.B0.84.E7.85.A7.E6.98.8E.E8.9B.8D.E5.85.89.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>全反射照明蛍光顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=11" title="節を編集: 全反射照明蛍光顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="rellink" style="margin-bottom: 0.5em; padding-left: 2em; font-size: 90%;" role="note">→詳細は「<a href="/wiki/%E5%85%A8%E5%8F%8D%E5%B0%84%E7%85%A7%E6%98%8E%E8%9B%8D%E5%85%89%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1" title="全反射照明蛍光顕微鏡">全反射照明蛍光顕微鏡</a>」を参照</div> <p>蛍光顕微鏡の照明に<a href="/wiki/%E5%85%A8%E5%8F%8D%E5%B0%84" title="全反射">全反射</a>を利用する方法。光は<a href="/wiki/%E5%B1%88%E6%8A%98%E7%8E%87" title="屈折率">屈折率</a>の大きい媒質から屈折率の小さい媒質に、ある角度より大きな角度で入射すると、全反射が起こる。全反射の際には境界面に光のしみ出し(<a href="/wiki/%E3%82%A8%E3%83%90%E3%83%8D%E3%83%83%E3%82%BB%E3%83%B3%E3%83%88%E5%A0%B4" title="エバネッセント場">エバネッセント波</a>)がある。<a href="/wiki/%E3%83%97%E3%83%AC%E3%83%91%E3%83%A9%E3%83%BC%E3%83%88" title="プレパラート">プレパラート</a>などで、屈折率の大きいスライドガラスと、それより小さい水の境界面でもこれらの現象が起こるので、蛍光顕微鏡でガラス面で全反射になるような照明を用いると、ガラス面の近傍の試料のみ選択的に蛍光観察ができる。蛍光検出力は生体1分子をも達成し、<a href="/wiki/%E4%B8%80%E5%88%86%E5%AD%90%E7%B4%B0%E8%83%9E%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6" class="mw-redirect" title="一分子細胞生物学">一分子細胞生物学</a>に貢献している。1990年代、日本で大きく発展した。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="ラマン顕微鏡"><span id=".E3.83.A9.E3.83.9E.E3.83.B3.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>ラマン顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=12" title="節を編集: ラマン顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <p>レーザーラマン顕微鏡とも呼ばれる。レーザー光を試料に照射したとき発生する<a href="/wiki/%E3%83%A9%E3%83%9E%E3%83%B3%E5%8A%B9%E6%9E%9C" title="ラマン効果">ラマン散乱</a>光を検出することで画像を得る。ラマン散乱光の波長(波長シフト量)は、試料に存在する分子、結合、<a href="/wiki/%E7%B5%90%E6%99%B6" title="結晶">結晶</a>格子等の振動数に依存する物質固有の値である。従って試料のラマン散乱スペクトルから、その試料に含まれる物質を同定し、同時に分布を見ることが可能となる。ラマン散乱光は微弱であり、従来はその検出やイメージングに要する時間が現実的なものではなかったが、光学系の工夫とプロセッサの発達に伴う演算時間の短縮により、顕微鏡への実装が可能となった。共焦点光学系により空間分解能を得るもの、狭帯域干渉フィルタによりラマン散乱光を分離するもの、非線形ラマン効果を利用するものなどがある。物質の同定能力としては<a href="/wiki/%E8%B3%AA%E9%87%8F%E5%88%86%E6%9E%90" class="mw-redirect" title="質量分析">質量分析</a>や<a href="/wiki/X%E7%B7%9A" title="X線">X線</a>元素分析に及ばないが、未処理の対象を生きたまま観察できる点は、非常に大きなアドバンテージである。 </p> <div class="mw-heading mw-heading3"><h3 id="非線形光学顕微鏡"><span id=".E9.9D.9E.E7.B7.9A.E5.BD.A2.E5.85.89.E5.AD.A6.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1"></span>非線形光学顕微鏡</h3><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=13" title="節を編集: 非線形光学顕微鏡"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <p>非線形光学顕微鏡とは光高調波発生、光混合、光パラメトリック効果、多光子遷移、非線形屈折率変化、電場依存屈折率変化等の非線形光学現象を利用した顕微鏡。 </p> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="光学顕微鏡の使用方法"><span id=".E5.85.89.E5.AD.A6.E9.A1.95.E5.BE.AE.E9.8F.A1.E3.81.AE.E4.BD.BF.E7.94.A8.E6.96.B9.E6.B3.95"></span>光学顕微鏡の使用方法</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=14" title="節を編集: 光学顕微鏡の使用方法"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <p>教育用顕微鏡の場合の例を示す。 </p> <ol><li>顕微鏡を直射日光の当たらない、明るい場所に置く。</li> <li>粗動ハンドルを回し、レボルバとステージとを遠ざける。</li> <li>レンズをケースから取り出す。対物レンズは取り付け部を上にして収納されているので、逆さに置いてからケース本体を外すようにし、取り付け部からの埃の侵入を防ぐ。</li> <li>接眼レンズ、対物レンズを、鏡筒内への埃の侵入を防ぐためこの順で取り付ける。レボルバを回転させ、低倍率の対物レンズを選択する。</li> <li>接眼レンズをのぞきながら反射鏡を動かし、明るさが均一になるようにする。危険なので決して直射日光を用いてはならない。</li> <li>プレパラートをステージの上に置き、観察対象物が対物レンズの真下になるように固定する。</li> <li>顕微鏡を横から見ながら、粗動ハンドルを動かして対物レンズとプレパラートを近づける。</li> <li>接眼レンズをのぞきながら、粗動ハンドルで対物レンズをステージから遠ざける方向に動かしてピントを合わせる。このとき、逆に回すとプレパラートと対物レンズが接触して両者を破損する危険がある。</li> <li>概ねピントが合ったらプレパラートを動かして観察しやすい像を探す。像は上下左右が逆に映っているので動かす方向に注意する。</li> <li>必要に応じレボルバを回転させ高倍率の対物レンズに変える。通常は同焦点設計になっており対物レンズを変えてもピントがずれないようになっているが、他社製など設計の異なるレンズが混ざっているとうまくいかないこともある。</li> <li>絞りで照明を、微動ハンドルでピントを調節しつつ観察する。</li> <li>使用後は埃・汚れを拭き取って収納する。ごく頻繁に使用するのであれば必ずしもレンズを外す必要はないが、通常は取り付け時と逆の順序で取り外し、収納する。万一レンズが汚れていたら説明書に従って清掃する。一般的にはカメラのレンズと同様に埃を払ってからレンズクリーニングペーパーで拭く。皮脂などの汚れには微量のエタノールなどで湿らせて用いる。</li></ol> <ul><li>絞りの使い方:教育用顕微鏡では円板絞りを備えることが多く、ステージの裏側に大小の穴が開いた円板が取り付けてある。これを回転させて使用する穴を選び、照明される範囲と入射光線の角度の範囲を調節する。明るくしようと必要以上に大きな穴を用いて観察領域外を照らしても迷光が増えるなど有害無益である。絞りは像のコントラストや焦点深度(ピントが合う奥行き)にも関係し、小さく絞った方がいずれも大きくなる。ただし小さく絞りすぎると解像度が落ち暗くなってかえって見にくくなる。</li> <li>ピント調節:手作業で薄く切った試料や微生物を水で封じたようなプレパラートには厚みがあり、特に高倍率では全体に一時にピントを合わせることはできない。そのため常にピントを調節しながら観察する必要があるが、このようなときは大きく動かすことはないので微動ハンドルを用いる。</li> <li>外部光源の利用:照明装置として反射鏡のみを備える場合、自然光を利用すると室内では特定の方向からしか取り入れられないので、多人数でいる場合など全員が利用できるとは限らない。天候にも左右される。そのため、机上に直管蛍光灯を平らに置く光源装置があり、その前に顕微鏡を並べて利用する。また、鏡の代わりにその固定部に取り付けることのできる簡易な光源もある。</li></ul> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="注釈"><span id=".E6.B3.A8.E9.87.88"></span>注釈</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=15" title="節を編集: 注釈"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <div class="reflist" style="list-style-type: decimal;"> <ol class="references"> <li id="cite_note-1"><b><a href="#cite_ref-1">^</a></b> <span class="reference-text">接眼側に凹レンズを用いて正立像を得る光学系</span> </li> <li id="cite_note-2"><b><a href="#cite_ref-2">^</a></b> <span class="reference-text"><a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.zeiss.co.jp/jp/micro/home.nsf/allBySubject/138B623F2F80D437C1256CB5003A9E56">ApoTome</a></span> </li> </ol></div> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="関連項目"><span id=".E9.96.A2.E9.80.A3.E9.A0.85.E7.9B.AE"></span>関連項目</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=16" title="節を編集: 関連項目"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <ul><li><a href="/wiki/%E5%85%89%E5%AD%A6" title="光学">光学</a></li> <li><a href="/wiki/%E9%96%8B%E5%8F%A3%E6%95%B0" title="開口数">開口数</a>&#160;: 対物レンズを特徴付ける量のひとつ</li> <li><a href="/wiki/%E7%B4%B0%E8%83%9E%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6" title="細胞生物学">細胞生物学</a>&#160;: 光学顕微鏡を利用することが多い分野</li></ul> <div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="外部リンク"><span id=".E5.A4.96.E9.83.A8.E3.83.AA.E3.83.B3.E3.82.AF"></span>外部リンク</h2><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%E5%85%89%E5%AD%A6%E9%A1%95%E5%BE%AE%E9%8F%A1&amp;action=edit&amp;section=17" title="節を編集: 外部リンク"><span>編集</span></a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></div> <ul><li><a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.jsap.or.jp/">(社)応用物理学会</a></li> <li><a rel="nofollow" class="external text" href="http://myosj.or.jp/">日本光学会</a></li> <li><a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.opticsdesign.gr.jp/">光設計研究グループ</a></li></ul> <div role="navigation" class="navbox authority-control" aria-label="Navbox" style="padding:3px"><table class="nowraplinks hlist navbox-inner" style="border-spacing:0;background:transparent;color:inherit"><tbody><tr><th scope="row" class="navbox-group" style="width:1%"><a href="/wiki/Help:%E5%85%B8%E6%8B%A0%E7%AE%A1%E7%90%86" title="Help:典拠管理">典拠管理データベース</a>: 国立図書館 <span class="mw-valign-text-top noprint" typeof="mw:File/Frameless"><a href="https://www.wikidata.org/wiki/Q912313#identifiers" title="ウィキデータを編集"><img alt="ウィキデータを編集" src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/8/8a/OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg/10px-OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg.png" decoding="async" width="10" height="10" class="mw-file-element" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/8/8a/OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg/15px-OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg.png 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/8/8a/OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg/20px-OOjs_UI_icon_edit-ltr-progressive.svg.png 2x" data-file-width="20" data-file-height="20" /></a></span></th><td class="navbox-list navbox-odd" style="text-align:left;border-left-width:2px;border-left-style:solid;width:100%;padding:0px"><div style="padding:0em 0.25em"> <ul><li><span class="uid"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://d-nb.info/gnd/4039237-5">ドイツ</a></span></li></ul> </div></td></tr></tbody></table></div> <!-- NewPP 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